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【信息分享】细胞实验经验讨论总结

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药徒
发表于 2012-12-14 23:38:08 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 zdlxcb 于 2012-12-15 18:45 编辑

在细胞实验室,有很多经验很难总结在书本上,但是与整个实验的成功却密切相关,现在建立新贴,想到哪里说道哪,随时补充并建议高手随时添加内容,大家共享自己实验中积累的小窍门。
1)细胞冻存管一般有1.5-2ml左右体积,原则上可以存放1.5ml充满均匀悬浮细胞的冻存液,一些人喜欢灌注1-1.5ml冻存液冻存,这实际上并不好。原因如下:冻存液冻存需要一段时间,如果这段时间冻存管倾斜,液体容易流到管口,很容易在后续的操作中造成污染。建议0.5-1ml之间即可。
2)许多教科书推荐细胞解冻用37度水,本人发现温度可以适当提高,39度也没有问题,虽然只提高了2度,却可以加速细胞解冻的时间。解冻后有提点挺重要,迅速用75%乙醇消毒冻存管管口和双手,然后进入下一步工作,随时别忘无菌操作。
3)当无菌操作台经常有多人工作时,记住自己用时,尽量把各种实验用物在紫外灯下消毒30-40分钟, 包括枪头,移液器,废液缸等容易忽略的物品。但是,不要让胰酶和培养液处在紫外灯照时下!
4)准备用实验台时,打开紫外灯的同时应打开鼓风机,如果操作太两边都有风机旋钮,应该保持两边风机风速一致,而且应该大于100,以免飞虫进入(当然不能吹灭酒精灯火苗)。最好再用75酒精蘸洁净一次性纸巾擦试所有可以消毒的地方,尤其是工作面。
5)如果不是通过两个圆孔进入手臂操作,而需要抬高操作台前置玻璃挡板,一般不要超过15厘米,主要目的还是减少污染几率。

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参与人数 1金币 +8 收起 理由
仲夏秋夜云 + 8 阳光普照咯

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药徒
 楼主| 发表于 2012-12-14 23:41:25 | 显示全部楼层
怎么会变成乱码了啊

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因为格式问题……文件可以先倒到TXT文本里看看有没有格式标志码~  详情 回复 发表于 2012-12-15 16:52
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药徒
发表于 2012-12-15 00:57:44 | 显示全部楼层
呵呵,楼主是老人了吧
照射紫外时即打开风机,30min或者以上才能形成无菌层流,节省时间。
还有,超净台内用酒精灯是老式中式做法,现在好多地方不用了。会产尘。而且,据说高效过滤器用久了会释放粒子,酒精灯易造成爆燃。

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你看起来也是业内认识啊,参加一下活动吧~这个信息分享或者工作感悟都很不错呢,前三名有奖励哦~https://www.ouryao.com/forum.php?mod=viewthread&tid=79635  发表于 2012-12-15 16:53
超净台里放酒精灯还会造成火灾。因为很多东西是喷了酒精放到超净台里的,我的手就被烧伤过一次,带着手套,手套上喷了酒精……  详情 回复 发表于 2012-12-15 16:52
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药生
发表于 2012-12-15 08:05:11 | 显示全部楼层
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药生
发表于 2012-12-15 16:52:12 | 显示全部楼层
longstory 发表于 2012-12-15 00:57
呵呵,楼主是老人了吧
照射紫外时即打开风机,30min或者以上才能形成无菌层流,节省时间。
还有,超净台 ...

超净台里放酒精灯还会造成火灾。因为很多东西是喷了酒精放到超净台里的,我的手就被烧伤过一次,带着手套,手套上喷了酒精……

点评

是滴,手上起泡,现在还有疤……  详情 回复 发表于 2012-12-16 17:29
嗯。以前不戴手套的时候,做细胞的新人很少手上还有汗毛的。现在戴手套了,烧起来摘也摘不掉。怕怕!  发表于 2012-12-15 20:57
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药生
发表于 2012-12-15 16:52:49 | 显示全部楼层
zdlxcb 发表于 2012-12-14 23:41
怎么会变成乱码了啊

因为格式问题……文件可以先倒到TXT文本里看看有没有格式标志码~
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药徒
发表于 2012-12-15 17:00:18 | 显示全部楼层
了解一下,谢谢分享

乱码是因为是你从其它论坛复制过来的,有些论坛会加入乱码...
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药生
发表于 2012-12-16 17:29:11 | 显示全部楼层
仲夏秋夜云 发表于 2012-12-15 16:52
超净台里放酒精灯还会造成火灾。因为很多东西是喷了酒精放到超净台里的,我的手就被烧伤过一次,带着手套 ...

是滴,手上起泡,现在还有疤……
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药生
发表于 2013-2-5 10:06:58 | 显示全部楼层
今日评分额度用完,明天来阳光普照
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药徒
发表于 2013-3-20 13:29:11 | 显示全部楼层
学习一下!谢谢!
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发表于 2017-10-26 20:46:56 | 显示全部楼层
新手上路,多多学习一下
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发表于 2018-1-4 14:18:58 | 显示全部楼层
现在的超净工作台的循环级别都挺高的,应该不会用到酒精灯了吧,毕竟使用酒精灯容易产生气溶胶等污染反而对工作台不好,不过这个也是针对一些比较好的超净工作台而言的
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发表于 2018-2-10 15:28:43 | 显示全部楼层
谢谢分享,很多小技巧学习了!
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