蒲公英 - 制药技术的传播者 GMP理论的实践者
标题: 气化过氧化氢灭菌程序及过程介绍 [打印本页]
作者: ielisa 时间: 2020-3-27 14:22
标题: 气化过氧化氢灭菌程序及过程介绍
对GMP车间洁净区定期进行灭菌是保证生产产品质量的一个重要环节。目前在我国对空间进行灭菌的常用方法是比较传统的甲醛熏蒸法。甲醛的杀菌能力不容置疑，但是随着科学技术的发展以及人们环保意识的增强，其越来越受到专家的质疑，因为甲醛是一种三致危害物。为了解决甲醛灭菌时间过长以及毒性和残留问题（会产生结晶状残留物），国内有不少企业开始采用气化过氧化氢灭菌技术。过氧化氢是一种广谱杀菌剂，气化过氧化氢灭菌技术由于灭菌时间短、无毒 、无残留，且灭菌效果容易验证，广泛被欧盟国家认可。我国的GMP认证要与欧盟接轨，洁净区采用过氧化氢灭菌技术必然为大势所趋。
目前气化过氧化氢灭菌已成为各国药典、药品生产质量管理规范(GMP)、消毒灭菌技术规范所推荐的方法，灭菌工艺已经非常成熟，重复性好，有专门的化学指示剂和生物指示剂验证过氧化氢气体分布均匀情况和无菌保证水平。可广泛应用于生物制药、医疗卫生、生物实验室和动物研究实验室等诸多领域。
[size=10.5000pt]一、试剂与仪器：
（1）生物指示剂（Biological Indicator，BI）：106CFU/片的嗜热脂肪芽孢杆菌，ATCC12980；
（2）化学指示剂（Chemical Indicator，CI）；
（3）浓度为30-35%的食品级过氧化氢溶液；
（4）胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB）；
（5）PEA MLT-17 zeta气化过氧化氢发生器；
（6）PEA LiRo气体分布系统；
（7）灭菌车间：某疫苗生产单位GMP洁净车间，洁净区层高2.8m、面积100㎡，空间总体积约280m3。
二、灭菌过程：
整个灭菌过程分为以下几个阶段：
（1）放置灭菌设备：将PEA MLT-17 zeta发生器和LiRo气体分布系统推入洁净区前，先将设备表面用75％酒精擦拭清除干净，根据灭菌空间体积大小，向储液桶内添加足量的过氧化氢溶液；
（2）调节环境温湿度：通过洁净车间的空调系统对洁净区的温度和湿度进行调控，使二者达到设备可以灭菌运行的区间范围，一方面保证灭菌效果，另一方面降低腐蚀风险；
（3）布点：在洁净车间内布置足量的生物指示剂和化学指示剂，并做好标记；
（4）通过设备端或平板电脑设置灭菌程序：一个完整的灭菌循环主要包含以下4个部分：调试阶段（Waiting，Conditioning，Heating），主要是为人员撤离以及设备预热阶段；快速注入阶段（Vapourizing 1），在此阶段过氧化氢气体以一个较快的速率注入待灭菌空间，环境中过氧化氢气体浓度迅速升高；慢速注入阶段（Vapourizing 2），在此阶段过氧化氢气体以一个较慢速率注入待灭菌空间，维持过氧化氢气体浓度保持一定的时间；降解阶段（Neutralisation，Afterrun，End），在此阶段过氧化氢气体迅速分解产生水分和氧气，环境中过氧化氢气体浓度迅速下降。