难溶性药物溶出-滤膜吸附求助

Liese

在考察药物溶出时，用对照品溶液考察滤膜吸附发现不管是离心还是不同的滤膜都吸附很严重，弃去10多毫升仍然饱和不了，离心也吸附，直接进样峰面积正常、离心和过滤后峰面积都减小很多，求助还有什么办法呢？？？离心管材质也考察了、滤膜材质也考察了，没找到合适的前处理方法

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世间始终你好

你遇到的是严重的滤膜或离心过程吸附问题，这在溶出度方法开发中确实棘手，尤其是遇到疏水性或高亲脂性成分时。你已经尝试了更换滤膜材质、离心、弃前几毫升滤液这些常规手段，但仍然不能解决。接下来可以考虑以下几个进阶应对策略：

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一、确认问题本质：吸附 or 降解？首先再次确认峰面积下降的原因：

• 使用标准溶液做滤膜吸附实验，确保不是样品本身降解；
• 如果标准溶液直接进样与过滤/离心后仍有差异，可以明确是前处理过程造成的吸附损失。
  

---

二、进阶解决思路与策略：1. 添加保护剂 / 抑制吸附剂可以尝试在溶液中加入小分子有机物作为保护剂，降低活性成分与容器/滤膜的相互作用：

• 比如加入 0.1% ~ 1% 的 Tween 80、PEG 400、SDS（钠十二烷基硫酸盐） 等表面活性剂。
• 这些添加剂可以显著减少疏水性药物对滤膜、离心管的吸附。
• 注意：这些添加剂必须在后续检测中不干扰色谱。
  

实验做法：对照品+不同浓度保护剂 → 分别进样与过滤后进样 → 比较峰面积。

---

2. 尝试更换为蛋白/有机质保护处理特别是对于易吸附的脂溶性药物，可以尝试在介质中加入：

• 0.5% BSA（牛血清白蛋白）
• 少量有机溶剂（如 5% 乙腈或甲醇）
• 少量甘油、葡聚糖等高亲水性高分子
  

这些也可起到竞争性吸附、封闭表面的作用。

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3. 修改样品前处理顺序

• 直接进样 → 再稀释（而非稀释后过滤）
• 或使用样品瓶预处理（如提前加入有机溶剂）
  

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4. 直接进样（Skip过滤）+ 方法验证支持

• 若不能避免过滤损失，考虑使用直接进样法，然后在方法验证中明确：
  

  “直接进样与过滤/离心后数据有显著差异，且直接进样结果准确、重复性良好，因此可采用直接进样作为标准操作。”
  

• 可通过加标回收率或系统适用性研究予以佐证，监管部门可以接受这种科学合理的豁免。
  

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5. 使用亲水改性滤膜材料虽然你已考察过滤膜材质，但推荐特别尝试以下材料：

• **聚醚砜（PES）**滤膜
• 聚四氟乙烯（PTFE）亲水改性型
• 尼龙膜（亲水性好的），看你是否用的是低蛋白吸附等级
  

并建议：每个滤膜先预润洗2-3 mL溶液再弃去，再接取测试样品。

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三、其他建议

• 使用低吸附塑料材质试剂瓶、离心管，如：PP（聚丙烯）洁净等级、硅化玻璃管等
• 优化色谱条件，增加检测灵敏度，在样品稀释度低时直接进样
• 结合**微量样品处理技术（如 SPME、μSPE）**也可能是出路，适用于难处理的样品
  

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总结建议路径：[td]

措施	推荐优先级	操作难度
添加表面活性剂（Tween 80 / PEG400 / SDS）	★★★★★	低
加少量有机溶剂/蛋白质封闭	★★★★	中
更换滤膜（亲水改性型 PES/PTFE）	★★★★	中
考虑直接进样法并验证其科学性	★★★★	中
高级材料如硅化玻璃 / 低吸附PP容器	★★★	中
微萃取/特殊前处理技术	★★	高

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如你能提供具体药物的名称或理化性质（如 LogP、pKa、水溶性等），我可进一步帮你精准推荐添加剂或方法调整方案。

Liese

世间始终你好 发表于 2025-07-31 20:48
本帖最后由 世间始终你好 于 2025-7-31 20:49 编辑

你遇到的是严重的滤膜或离心过程吸附问题，这在溶出度方法开发中确实棘手，尤其是遇到疏水性或高亲脂性成分时。你已经尝试了更换滤膜材质、离心、弃前几毫升滤液这些常规手段，但仍然不能解决。接下来可以考虑以下几个进阶应对策略：
一、确认问题本质：吸附 or 降解？首先再次确认峰面积下降的原因：
使用标准溶液做滤膜吸附实验，确保不是样品本身降解； 如果标准溶液直接进样与过滤/离心后仍有差异，可以明确是前处理过程造成的吸附损失。
二、进阶解决思路与策略：1. 添加保护剂 / 抑制吸附剂可以尝试在溶液中加入小分子有机物作为保护剂，降低活性成分与容器/滤膜的相互作用：
比如加入 0.1% ~ 1% 的 Tween 80、PEG 400、SDS（钠十二烷基硫酸盐） 等表面活性剂。这些添加剂可以显著减少疏水性药物对滤膜、离心管的吸附。 注意：这些添加剂必须在后续检测中不干扰色谱。
实验做法：对照品+不同浓度保护剂 → 分别进样与过滤后进样 → 比较峰面积。
2. 尝试更换为蛋白/有机质保护处理特别是对于易吸附的脂溶性药物，可以尝试在介质中加入：
0.5% BSA（牛血清白蛋白）少量有机溶剂（如 5% 乙腈或甲醇）少量甘油、葡聚糖等高亲水性高分子
这些也可起到竞争性吸附、封闭表面的作用。
3. 修改样品前处理顺序直接进样 → 再稀释（而非稀释后过滤）或使用样品瓶预处理（如提前加入有机溶剂）
4. 直接进样（Skip过滤）+ 方法验证支持若不能避免过滤损失，考虑使用直接进样法，然后在方法验证中明确：
“直接进样与过滤/离心后数据有显著差异，且直接进样结果准确、重复性良好，因此可采用直接进样作为标准操作。”
可通过加标回收率或系统适用性研究予以佐证，监管部门可以接受这种科学合理的豁免。
5. 使用亲水改性滤膜材料虽然你已考察过滤膜材质，但推荐特别尝试以下材料：
**聚醚砜（PES）**滤膜聚四氟乙烯（PTFE）亲水改性型尼龙膜（亲水性好的），看你是否用的是低蛋白吸附等级
并建议：每个滤膜先预润洗2-3 mL溶液再弃去，再接取测试样品。
三、其他建议使用低吸附塑料材质试剂瓶、离心管，如：PP（聚丙烯）洁净等级、硅化玻璃管等优化色谱条件，增加检测灵敏度，在样品稀释度低时直接进样结合**微量样品处理技术（如 SPME、μSPE）**也可能是出路，适用于难处理的样品
总结建议路径：[td]措施推荐优先级操作难度添加表面活性剂（Tween 80 / PEG400 / SDS）★★★★★低加少量有机溶剂/蛋白质封闭★★★★中更换滤膜（亲水改性型 PES/PTFE）★★★★中考虑直接进样法并验证其科学性★★★★中高级材料如硅化玻璃 / 低吸附PP容器★★★中微萃取/特殊前处理技术★★高如你能提供具体药物的名称或理化性质（如 LogP、pKa、水溶性等），我可进一步帮你精准推荐添加剂或方法调整方案。

谢谢您！其实我尝试过加sds是有用的，但是我的标准介质加可以、剩下的介质CDE不是不建议加这些东西嘛，所以想着能不加就不加，结果吸附就很大直接进样的话有很多不溶性辅料、没法直接进样，而且规格很小也不好再稀释了…我是打算再考察一下低浓度的sds对吸附的影响

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