无菌检查菌种复苏与菌落计数

微信7a5bfe91 · 发表于昨天 16:53

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各位同行，想问问大家，看了药典的内容，感觉计数CFU无解了，药典上说2~8℃菌液需要在24小时内使用。如果需要划平板长菌落来计数，是不是需要超过24小时，那最开始复苏后的菌液只能冻存。在确定了cfu后，解冻的菌液还要复苏吗，还是可以直接使用[捂脸]

羽遥 · 发表于昨天 17:16

别把菌液冻存，应该冻存的是原始菌种；
每次用的时候从冻存菌种里取一点新鲜复苏来配制菌液，这样新配的菌液就能在24小时内用完

jinn512 · 发表于昨天 17:48

之前做过一段时间，有点忘了，但我记得是同步做生理盐水稀释和熔融TSA倾注计数，然后放37摄氏度促生长，然后第二天计数，看哪个稀释梯度的菌落数合适就用确定用哪个梯度的稀释液去做实验

34f54f29 · 发表于 1 小时前

你的难点是无法确认菌液浓度，比如接种不大于100CFU怎么控制

自己制菌液确实有难度，这个基本靠经验摸索，比如18~24小时的细菌菌悬液基本是7次方左右，你估计一下稀释梯度；也有用比浊仪测试的
关于你说的计数问题，你看这样可不可行，细菌过夜基本能看到数量，下午菌悬液计数，第二天上午看到数量，上午接种，菌液在24小时内。黑曲就要自己摸索了，比浊仪也可以测孢子浓度
比浊仪要先做一个浓度曲线做参考

所以现在买定量菌株的比较多，省事

Mr●小肚子♂ · 发表于半小时前

“如果需要划平板长菌落来计数，是不是需要超过24小时”
这个不需要24小时吧，一般细菌有个18-20小时就足够了，菌液2-8保存24小时，相当于有4-6小时的缓冲，够了

微信7a5bfe91 · 发表于 10 分钟前

34f54f29 发表于 2025-11-13 10:06
你的难点是无法确认菌液浓度，比如接种不大于100CFU怎么控制

自己制菌液确实有难度，这个基本靠经验摸索 ...

感谢

微信7a5bfe91 · 发表于 9 分钟前

Mr●小肚子♂ 发表于 2025-11-13 10:24
“如果需要划平板长菌落来计数，是不是需要超过24小时”
这个不需要24小时吧，一般细菌有个18-20小时就足 ...

嗯嗯，好像是有可操作空间，谢谢

微信7a5bfe91 · 发表于 8 分钟前

羽遥发表于 2025-11-12 17:16
别把菌液冻存，应该冻存的是原始菌种；
每次用的时候从冻存菌种里取一点新鲜复苏来配制菌液，这样新配的菌 ...

嗯嗯

微信7a5bfe91 · 发表于 7 分钟前

jinn512 发表于 2025-11-12 17:48
之前做过一段时间，有点忘了，但我记得是同步做生理盐水稀释和熔融TSA倾注计数，然后放37摄氏度促生长，然 ...

okok，谢谢

34f54f29 · 发表于 7 分钟前

微信7a5bfe91 发表于 2025-11-13 11:08
嗯嗯，好像是有可操作空间，谢谢

黑曲菌悬液的有效期长，也是可以操作的

[检验及监测] 无菌检查菌种复苏与菌落计数

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