菌种复苏传代问题

沙华 · 发表于 2025-12-3 16:03:45

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大家对常用的金葡，大肠，沙门，枯草，黑曲，绿脓，生孢，大家如何复苏保存传代。那几个用甘油保存，那几个用斜面，我越看药典越乱，有没有明白人啊

lxiaof · 发表于 2025-12-3 16:39:11

1-2代菌种长期保存是甘油管冻存，3代以后菌种仅需要斜面保存，方便定期传代。

诺诺ヘ · 发表于 2025-12-3 16:39:36

先看你能提供什么保存条件吧，目前超低温+甘油冻存管应该是用的最多的
黑曲霉有说法是甘油冷冻会导致孢子失活，但是五六年了没遇到过
铜绿假单胞菌斜面保存需要常温，冷藏环境会导致菌种自溶，冻存管不会

不见猫骨头 · 发表于 2025-12-3 17:10:35

我们都是用甘油保存的，这个应该是看公司吧，没有规定说必须是甘油或者是斜面；之前去浙江省省院他们也是甘油保存；前同事和同学所在的公司有的甘油、有的是斜面、有的两者都有

左手的记忆～1 · 发表于 2025-12-3 17:14:29

金葡，大肠，沙门，枯草，黑曲，绿脓，生孢这几个菌都1代和2代标准储备菌株可以用甘油+超低温保存，对于斜面保存一般是黑区霉的保存（保存时间较短），用的时候可以省去传代培养的时间

千里宋人头 · 发表于 2025-12-4 11:00:08

低温加甘油管保存比较多一点，部分保存可以到五年以上，复温也比较简单

沙华 · 发表于 2025-12-4 17:16:27

我想问的是零代菌株来了之后，这几种菌怎么复苏黑曲和生孢是穿刺或者斜面复苏培养保存孢子吗

酒酿汤圆 · 发表于 2026-1-9 11:17:14

诺诺ヘ发表于 2025-12-3 16:39
先看你能提供什么保存条件吧，目前超低温+甘油冻存管应该是用的最多的
黑曲霉有说法是甘油冷冻会导致孢子 ...

想问一下，你们甘油冷冻保存的温度是多少，效期大概多久？甘油的浓度是多少，使用时候是复温后，直接进行菌液稀释还是液体复苏后再使用？

酒酿汤圆 · 发表于 2026-1-9 11:17:35

千里宋人头发表于 2025-12-4 11:00
低温加甘油管保存比较多一点，部分保存可以到五年以上，复温也比较简单

想问一下，你们甘油冷冻保存的温度是多少。？甘油的浓度是多少，使用时候是复温后，直接进行菌液稀释还是液体复苏后再使用？

酒酿汤圆 · 发表于 2026-1-9 11:17:57

不见猫骨头发表于 2025-12-3 17:10
我们都是用甘油保存的，这个应该是看公司吧，没有规定说必须是甘油或者是斜面；之前去浙江省省院他们也是甘 ...

想问一下，你们甘油冷冻保存的温度是多少，效期大概多久？甘油的浓度是多少，使用时候是复温后，直接进行菌液稀释还是液体复苏后再使用？

不见猫骨头 · 发表于 2026-1-9 12:02:17

酒酿汤圆发表于 2026-1-9 11:17
想问一下，你们甘油冷冻保存的温度是多少，效期大概多久？甘油的浓度是多少，使用时候是复温后，直接进行 ...

按照19年中国药典检验标准操作规范里面规定，甘油冻存的保存温度最好是-80℃（至少在-30℃以下保存）；甘油的终浓度是20%~50%（我们一般是20%），效期需要验证，我们验证的三年，所以我们就规定了三年；使用的时候水浴解冻，然后转移至相对应的培养基中进行复苏使用

诺诺ヘ · 发表于 2026-1-9 14:29:41

酒酿汤圆发表于 2026-1-9 11:17
想问一下，你们甘油冷冻保存的温度是多少，效期大概多久？甘油的浓度是多少，使用时候是复温后，直接进行 ...

目前验证的是-50℃保存1年效期，甘油菌液1：1 使用时复温增菌培养之后稀释

[检验及监测] 菌种复苏传代问题