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日志

如何避免细胞培养瓶内的细胞抱团

已有 301 次阅读2021-9-28 14:41

细胞培养是指在体外模拟体内环境,使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。在利用细胞培养瓶进行细胞培养过程中会遇到各种各样的问题,细胞抱团就是比较常见的一类,如果细胞培养前期多加注意,这种情况是可以避免的。

如何避免细胞培养瓶内的细胞抱团

T175细胞培养瓶

培养液中含钙、镁离子容易导致细胞抱团,所以洗涤细胞时要注意使用无钙镁平衡盐的溶液。对于贴壁非常牢固的细胞,可以分多批多次消化,这样可以较大程度地降低胰酶对细胞的损伤,保证细胞的良好状态,避免细胞抱团。细胞生长密度过高也容易导致细胞成簇,70%-80%的密度就好,这样可以大大降低细胞抱团的几率。

96孔细胞培养板


如果细胞已经长成集落,可先将细胞低密度传代,第二天再消化传代,这样连续传三次,细胞抱团就会越来越小,几次传代后,再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个的。消化过程中尽量不要使劲摇动细胞,这样细胞特别容易成屑样脱落。细胞一旦脱落入悬液里就很难再将其吹打成单个,所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,严格控制好消化程度。

血清培养基瓶

培养好细胞是一门很深的学问,细胞的质量、培养液成分、细胞生长密度等都会影响到细胞的生长。避免细胞培养瓶内的细胞抱团可以从以上几个方面进行把控,这样才可以确保细胞培养工作的顺利进行。


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