黑曲霉如何做成冻存管？

bbjup520 · 发表于 2017-2-13 09:34:10

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从检定所购买液体的黑曲霉菌如何制成冻存管，需要详细步骤。求大家帮助我。

卡卡杰队 · 发表于 2018-6-7 12:44:42

首先接种于SDA斜面上（斜面利于后面孢子洗脱），按照药典规定，20-25℃培养5-7天，或直到获得丰富的孢子，然后用含0.05%吐温80的无菌PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或者0.9%的无菌氯化钠溶液将孢子洗脱下来，制成孢子菌悬液，然后跟20%的无菌甘油水溶液1:1混合，混合完成后先放到-20℃冷冻一晚，然后再放到-72℃以下，可长期保存。

joshua · 发表于 2017-2-13 09:46:25

先用含吐温的0.9%NaCL把孢子洗脱下来，然后和等体积的冻存液（一般 20%甘油的0.9%NaCl）混合，封装冻存

bbjup520 · 发表于 2017-2-13 09:50:29

joshua 发表于 2017-2-13 09:46
先用含吐温的0.9%NaCL把孢子洗脱下来，然后和等体积的冻存液（一般 20%甘油的0.9%NaCl）混合，封装冻存

吐温-80含量多少，能用稀释剂洗脱吗？要先SDB增菌后SDA斜面培养后洗脱孢子

joshua · 发表于 2017-2-13 10:02:00

bbjup520 发表于 2017-2-13 09:50
吐温-80含量多少，能用稀释剂洗脱吗？要先SDB增菌后SDA斜面培养后洗脱孢子

按药典规定啊！！ 0.05% 体积比；加吐温是为了容易把孢子“洗”下来，直接用盐水也能弄一点，旦效果不好

直接接到SDA斜面，等它孢子长出来

Ninazhao · 发表于 2017-2-13 10:29:27

先转种至SDA，获得丰富孢子后，再洗脱，然后和等体积的冻存液混匀，分装即可.

一片红云 · 发表于 2017-2-13 10:37:16

学习一下。

bbjup520 · 发表于 2017-2-13 11:49:18

谢谢朋友们的帮助，非常感谢

anqingwjf · 发表于 2017-2-13 12:38:24

学习一下非常感谢

KHX · 发表于 2018-7-5 21:06:26

请问这个方法的来源自哪里？学习学习，谢谢！

_xRmRY · 发表于 2018-7-20 22:03:13

学习一下

275025255 · 发表于 2018-8-13 14:05:47

谢谢分享！

[检验及监测] 黑曲霉如何做成冻存管？

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