【Q&A】细胞治疗用慢病毒有效期的制定

姣妹崽

慢病毒载体的滴度是慢病毒最为关键的质量属性之一，不同CAR-T制备工艺在慢病毒的用量上差别较大，同时，不同的慢病毒制备工艺所生产的慢病毒的滴度也相差较大。而慢病毒的稳定性又与滴度的高低直接相关。当需求量为2*10^8TU病毒时，不同滴度慢病毒用量如下：

滴度（TU/ml）	用量（ml）
2*10^7	10
5*10^7	4
1*10^8	2

假设细胞制备工艺可接受加入慢病毒最大量为10ml，慢病毒滴度最低2*10^7 TU/ml可用。一般情况下，慢病毒液体密封保存在-80℃超低温冰箱中，但时间、反复冻融、温度变化等因素均会引起慢病毒滴度的降低。
问题1：如上述描述所说，慢病毒的质量标准是否可将滴度定为＞2*10^7 TU/ml？
问题2：针对上述三种滴度的慢病毒，相应可存放的时间必定不同，每个批次所生产的慢病毒滴度也不可能完全相同。有数据表明，同样的存放时间，滴度越高，滴度降低的速度越慢。针对此种情况，慢病毒稳定性试验应该如何开展，仅针对3批次数据进行稳定性考察是否合理？慢病毒的有效期应该如何制定？
问题3：由于冻融会对慢病毒滴度产生影响，那么慢病毒滴度的初次确认，应在分装好后直接进行滴度确认？还是模拟实际使用情况冻融1次后进行滴定确认？

月辉

问题1：质量标准是滴度应该可以定为＞2*10^7 TU/ml。
问题2：每次生产的总滴度是差不多的，所以每次按固定体积分装，每个滴度在1*10^8左右，分装规格只有一个，所以只做一个规格做稳定性。
问题3：模拟实际使用情况冻融1次后进行滴定确认。
一种产品只会有一种工艺，为什么会用不同的慢病毒制备工艺生产慢病毒，工艺没确定对话就没必要做稳定性啊。

小猪吃你

月辉 发表于 2021-10-12 09:21
问题1：质量标准是滴度应该可以定为＞2*10^7 TU/ml。
问题2：每次生产的总滴度是差不多的，所以每次按固定 ...

逻辑清晰

同行通行

细胞生物学专业，也非常喜欢细胞相关研究，可惜事与愿违，进的公司只在规划中有细胞研究

乐乐辰

问题3
稳定性指导原则里，提到用包装完整，市售包装进行，不同包装的还需要分开做稳定性试验，
所以个人拙见：不建议分装后冻融，每次使用完整状态的产品进行稳定性的各项检测，就涉及批次样本量问题了

姣妹崽

乐乐辰 发表于 2021-10-22 15:51
问题3
稳定性指导原则里，提到用包装完整，市售包装进行，不同包装的还需要分开做稳定性试验，
所以个人 ...

不分装直接冻融这个不太可行吧，与实际使用情况完全不符呀

乐乐辰

姣妹崽 发表于 2021-10-22 16:14
不分装直接冻融这个不太可行吧，与实际使用情况完全不符呀

作为产品直接用的时候的包装来冻融，我说的分装可能不是很清晰，不好意思哈
假如是2ml市售使用（完整包装），就不建议分装两个1ml这样做冻融稳定性