PtoteinA-HPLC法测定细胞液蛋白含量，重现性差，是什么原因呀？

huangpeinan · 发表于 2022-8-29 10:14:26

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锦毛鼠 · 发表于 2022-8-29 11:24:14

@余默

米斯特道格 · 发表于 2022-8-29 12:53:28

可以稍微详细一点吗？怎么个重现性差？多次实验还是换实验室。

huangpeinan · 发表于 2022-8-29 15:53:07

米斯特道格发表于 2022-8-29 12:53
可以稍微详细一点吗？怎么个重现性差？多次实验还是换实验室。

新旧色谱柱，对照的标曲峰面积是一致的，但样品的峰面积差一倍

米斯特道格 · 发表于 2022-8-29 16:47:03

huangpeinan 发表于 2022-8-29 15:53
新旧色谱柱，对照的标曲峰面积是一致的，但样品的峰面积差一倍

用什么做的标曲？标曲性质和样品是否一致？
新色谱柱有没有做预处理饱和一下，这个峰面积差异是不是新色谱柱的第一次检测？再跑几针还是这样的嘛？
一般来说protrin-A的柱子使用前需要用高浓度蛋白饱和一下。
其他的考虑部分信息有点少。

余默 · 发表于 2022-8-29 17:29:16

huangpeinan 发表于 2022-8-29 15:53
新旧色谱柱，对照的标曲峰面积是一致的，但样品的峰面积差一倍

同一个样品么，还是不同样品

PGYPGYPGY2021 · 发表于 2022-8-29 19:07:01

楼主，请教一下，样品预处理方式对结果有影响吗吗？比如，先离心再用0.45μm膜过滤后测，与直接离心后取上清液测，结果有差异吗？

[质量控制QC] PtoteinA-HPLC法测定细胞液蛋白含量，重现性差，是什么原因呀？