金葡菌阳性对照平行样相差有点大

禾希 · 发表于 2023-3-23 20:28:23

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各位老师，请教一个问题！就是我做金葡菌的阳性对照时取得10的负6稀释度，一个平板涂布是43，一个平板是98，平行样相差的有点大，这是怎么回事！我同一个稀释度用的是一个涂布棒，菌液吸取的是100微升。

wzzz2008 · 发表于 2023-3-23 21:31:03

做啥实验，为啥要用涂布法呢？
原因可能有很多，涂布工具的残留，均匀性，都有可能。
微生物在菌液中的分布状态，相当于乒乓球分布在PM2.5中，均匀性本来就不如小分子，另外，一个菌落，并不一定是一个细菌形成的，而可能是多个。

信苏 · 发表于 2023-3-23 22:26:00

按照药典规定，菌落数15以上，相差一倍不能接受。可能是取样前没有摇匀，平皿涂布法应该每皿单独一个，或者直接用平皿倾注法就行了。

joshua · 发表于 2023-3-24 08:42:01

所试几次，如果每次都是很不平行再考虑系统因素，偶发的只能说明那一次手抽筋了

简单～～幸福 · 发表于 2023-3-24 12:49:03

菌液吸取之前摇匀

禾希 · 发表于 2023-3-29 11:03:16

wzzz2008 发表于 2023-03-23 21:31
做啥实验，为啥要用涂布法呢？
原因可能有很多，涂布工具的残留，均匀性，都有可能。
微生物在菌液中的分布状态，相当于乒乓球分布在PM2.5中，均匀性本来就不如小分子，另外，一个菌落，并不一定是一个细菌形成的，而可能是多个。

紫外灯消毒效果验证，做个阳性对照计数好推算浓度的。我一直用的涂布法，之前好好的，就近段时间怎么涂都不平均，给我整emo了

禾希 · 发表于 2023-3-29 11:04:27

简单～～幸福发表于 2023-03-24 12:49
菌液吸取之前摇匀

摇匀了的我还担心是不是摇匀的时候残留在试管壁上了，我摇匀前和摇匀后都尝试了，还没有摇匀前做的平均呢

禾希 · 发表于 2023-3-29 11:06:11

joshua 发表于 2023-03-24 08:42
所试几次，如果每次都是很不平行再考虑系统因素，偶发的只能说明那一次手抽筋了

自从那一次偶发之后，每次我都不平均了

禾希 · 发表于 2023-3-29 11:21:14

信苏发表于 2023-03-23 22:26
按照药典规定，菌落数15以上，相差一倍不能接受。可能是取样前没有摇匀，平皿涂布法应该每皿单独一个，或者直接用平皿倾注法就行了。

您的意思是每皿都换新的涂布棒吗，稀释度一样的也这样执行吗？

毅-yi · 发表于 2023-3-29 14:37:40

每次计数接种菌液前都用混悬仪混匀，同一稀释级涂布时共用一根涂布棒本来就会导致计数有差距，但不至于这么大，你可以先试试每个皿一根涂布棒涂布。

禾希 · 发表于 2023-3-29 15:11:55

毅41e8ddbd 发表于 2023-03-29 14:37
每次计数接种菌液前都用混悬仪混匀，同一稀释级涂布时共用一根涂布棒本来就会导致计数有差距，但不至于这么大，你可以先试试每个皿一根涂布棒涂布。

嗯嗯谢谢！还有别的好的建议吗？会不会和涂布力度有关。我之前涂的力度适中偏重，较平均，这几次比较轻，同一个涂布棒结果就相差较大了。

[无菌&限度检查] 金葡菌阳性对照平行样相差有点大