第5问：什么是泵的“延迟体积”（Dwell Volume）？它在方法转移时为何重要？

蒲公英

写在前面：

《依利特HPLC百问百答》是一个专门为色谱人打造的知识加油站，这里有您想知道的干货，我们用最接地气的话，聊最硬核的技术，让复杂的仪器原理变得像聊天一样轻松。

答：延迟体积（Dwell Volume），梯度洗脱的"时间差"

如果把液相色谱比作一场接力赛，延迟体积就是"交接棒区域"的距离。

想象一下，你在泵那里调配好了流动相"配方"——比如30%的乙腈混70%的水，但这个"新配方"要走一段路才能真正到达色谱柱。这段"路"包括混合器、管路、进样阀……所有这些空间加起来的体积，就叫延迟体积。

为什么叫"延迟"？

做梯度洗脱时，你设定"0分钟开始改变流动相比例"，但色谱柱那边还在"傻等"——因为新配好的流动相还在路上！

打个比方：你点外卖，商家0分钟接单开始做，但你要等外卖小哥送到手里才能吃上。从商家出餐点（混合点）到你家门口（柱入口），这段配送距离就是"延迟体积"，配送时间就是"延迟时间"。

不同仪器差别有多大？

这就有意思了！

传统HPLC：管路粗、混合器大，延迟体积可能2-5 mL

UHPLC超高效液相：管路细、结构紧凑，可能只有0.1-0.3 mL

差了十几倍！ 就像一个外卖商家在隔壁街，一个在三公里外，送达时间能一样吗？

方法转移时的"大坑"

这是今天的重点！

假设你在仪器A上开发了完美方法：0分钟开始梯度，目标化合物6分钟出峰。换到仪器B上一跑——峰跑到7分钟去了，甚至分离度都变了！

罪魁祸首就是延迟体积不同！

仪器A：延迟体积1 mL，流速1 mL/min，延迟1分钟

仪器B：延迟体积3 mL，流速1 mL/min，延迟3分钟

同样写"0分钟开始梯度"，但流动相真正抵达色谱柱的时间差了2分钟！化合物遇到的洗脱条件完全不同，保留时间当然会"跑偏"。

怎么破解？

方法一：计算补偿测出两台仪器的延迟体积差异，调整梯度时间表，让"起跑线"对齐。

方法二：加等度平衡在梯度前加一段等度洗脱，给不同仪器留出"缓冲时间"，抹平差异。

一句话总结：

延迟体积是流动相从混合点到色谱柱入口的"配送距离"，不同仪器这个距离不同，会导致梯度"迟到"时间不同，直接影响保留时间。方法转移时必须考虑并调整，否则结果会"跑偏"让你怀疑人生！

下期预告：单向阀（Check Valve）的作用是什么？它失效会有什么表现？

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你这是线性洗脱吧，梯度洗脱还谈啥死体积哦

greatwolf

提督洗脱也要考虑死体积的

苦练叉腰肌

方法开始前都会加平衡时间吧

Lily_VIP

学习学习

PFangxh656797

学习  学习  确实有时没想到