微生物限度方法验证

hem2002

2015版药典，没有培养基稀释法，胶囊剂用薄膜过滤法又不好抽滤，那么请问还能用什么方法来检测呢，请高手指点下！

cgycxd

抢个沙发，楼主说的不是太详细啊，难道稀释液不能稀释样品吗？胶囊剂有抑菌性吗？如果没有的话直接培养基浇注培养即可

hem2002

cgycxd 发表于 2015-9-29 11:38
抢个沙发，楼主说的不是太详细啊，难道稀释液不能稀释样品吗？胶囊剂有抑菌性吗？如果没有的话直接培养基浇 ...

我们的样品（比如阿莫西林）是有抑菌性的，我们10版经过验证就是用的培养基稀释法，才使回收率达到要求
的。

cgycxd

新药典微生物限度有哪些方法，具体情况我也不清楚，因为具体操作不是我，也没参加培训，抽空看看，新药典要求。楼主有答案了也通知我一声，共同提高啊

排排座食果果儿

hem2002 发表于 2015-9-29 15:10
我们的样品（比如阿莫西林）是有抑菌性的，我们10版经过验证就是用的培养基稀释法，才使回收率达到要求
...

您好，我们最近也遇到这样类似的问题。不过最后得到解决了！我们原来也是培养基稀释法的，现在用的是薄膜过滤法的。具体方法学是省所做的方法学验证。说起来，咱们好像是一样的。具体细节，我们是把1：10供试液先过滤一下，取滤液加至稀释液中，再进行抽滤，之后再用用四次冲洗液冲洗，算起来，加上之前加稀释液的那次，一共是冲洗五次，这样的话，实验就很快完成了。而且抽滤还不存在滤膜堵的问题。不过具体问题，还得具体分析，你可以结合你们家的产品，先做一下，方法学，看看回收率如何。希望，可以帮到你！

hem2002

排排座食果果儿 发表于 2015-10-4 09:46
您好，我们最近也遇到这样类似的问题。不过最后得到解决了！我们原来也是培养基稀释法的，现在用的是薄膜 ...

我们以前也用过这个方法，但是我们是胶囊剂，取稀释10倍的样品加入稀释液中再抽滤，还是会堵塞滤膜。

排排座食果果儿

hem2002 发表于 2015-10-15 11:13
我们以前也用过这个方法，但是我们是胶囊剂，取稀释10倍的样品加入稀释液中再抽滤，还是会堵塞滤膜。

那你们现在怎么办啊？问题还没解决呢？我们开始也是那样的，后来我们尝试了好多种滤纸，最后还是用定量的滤纸过滤效果好，你可以中间换一次滤纸啊，再取滤液加到稀释液中，再过滤。要是还不行的话，那我也是没办法了，不过真心希望你们的问题能够解决！

逝水无痕兔兔

15版药典有培养基稀释法的

逝水无痕兔兔

15版药典  通则1105中（第142页）抗菌活性的去除或灭活（2）增加稀释液或培养基体积

hem2002

逝水无痕兔兔 发表于 2015-10-15 20:41
15版药典  通则1105中（第142页）抗菌活性的去除或灭活（2）增加稀释液或培养基体积

新版是规定了，增加培养基或稀释液的，是不是可理解为，还是可以用培养基稀释法呢，因为那样也是增加了培养基的量呀，

hem2002

排排座食果果儿 发表于 2015-10-4 09:46
您好，我们最近也遇到这样类似的问题。不过最后得到解决了！我们原来也是培养基稀释法的，现在用的是薄膜 ...

你们是把1：10供试液先过滤一下，取滤液加至稀释液中，再进行抽滤。那你们先抽滤1：10供试液是多少量呢，再加稀释液又稀释成多少倍，是不是提高了稀释级再抽滤的呢

bio12

排排座食果果儿 发表于 2015-10-4 09:46
您好，我们最近也遇到这样类似的问题。不过最后得到解决了！我们原来也是培养基稀释法的，现在用的是薄膜 ...

有两个问题请教：
（1）试验菌什么时候加入呢？最后一次冲洗液中么？
（2）用滤纸先过滤，是普通过滤还是抽滤？过滤能有效的去除了固体不溶物，但会不会因为其略强的吸附作用，而导致检验结果而受到挑战呢？