关于梯度洗脱

NPi0Vv7ZY9 · 发表于 2016-6-12 15:53:53

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做梯度洗脱时，梯度应该怎么变才能更好保护柱子，现在研究的一种新产品由于分离度不好，所以无机盐浓度我调低了，想在检测完所要产品时，加大甲醇浓度来将后面的杂质洗出来，但是时间真的好长，一个样要测一个半小时！又不敢梯度弄得太大，排怕损伤了柱子！求各位大神指教！谢谢！

ywz · 发表于 2016-6-12 16:32:43

含盐的流动相做完后不能用纯有机溶剂冲洗，容易析出结晶堵柱子。先用10%甲醇冲洗，再用纯甲醇

NPi0Vv7ZY9 · 发表于 2016-6-12 16:41:02

含盐的流动相做完后不能用纯有机溶剂冲洗，容易析出结晶堵柱子。先用10%甲醇冲洗，再用纯甲醇[/quote]
谢谢！就是梯度洗脱时方法我还没确定！如果甲醇浓度从3%升到20%，会不会对柱子损伤很大？

实验室 · 发表于 2016-6-12 16:50:25

具体情况还得咨询色谱柱公司和色谱柱的使用说明，你这个比例变化不算大

ywz · 发表于 2016-6-12 17:21:28

水相比例少于5%长时间冲洗对柱子损伤较大，大于10%影响不大。应该是常用的C18的柱子吧，楼主也没说

ag231 · 发表于 2016-6-12 17:26:25

有无机盐的流动相我们基本先选择用水冲洗后甲醇再从低到高冲洗

NPi0Vv7ZY9 · 发表于 2016-6-12 19:33:36

水相比例少于5%长时间冲洗对柱子损伤较大，大于10%影响不大。应该是常用的C18的柱子吧，楼主也没说[/quote]
谢谢提点，是的，用的是C18的柱子！

NPi0Vv7ZY9 · 发表于 2016-6-12 19:34:37

有无机盐的流动相我们基本先选择用水冲洗后甲醇再从低到高冲洗[/quote]
现在我做的是梯度洗脱，有无机盐也有有机相的。