菌悬液稀释问题

青梅竹马 · 发表于 2017-1-13 12:51:18

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菌悬液稀释方法的思路：取磁珠冷冻管磁珠一颗加10ml培养基，细菌培养温度33、时间24h，真菌培养温度23、时间48h，黑曲霉：5天，得到新鲜菌液（有效期1个月），这样是否稀释级都在10负6次方（100cfu/ml）?还有每次要用菌悬液都要提前1天确定稀释级别吗？每次确定好麻烦。

juanx · 发表于 2017-1-13 13:17:16

每次都需要确认一下，黑曲霉应该是接SDA斜面的。每次培养时间不一样或是接入量不一样还是会有区别的。你必须要有数据证明你接入的菌液含菌量在你要求的控制范围内。

青梅竹马 · 发表于 2017-1-13 13:27:57

juanx 发表于 2017-1-13 13:17
每次都需要确认一下，黑曲霉应该是接SDA斜面的。每次培养时间不一样或是接入量不一样还是会有区别的。你必 ...

我也是这样做的，好像要好多人都是在凭经验来做稀释，这个经验据说准确机率还很高。想学习一下

juanx · 发表于 2017-1-13 13:51:41

经验也只是说可以使用和计数同步，没说凭经验不需要计数。你的新鲜菌液有效期是1个月，这个就不好说了。你一直做下来，稀释级都很准吗?

青梅竹马 · 发表于 2017-1-17 12:01:53

juanx 发表于 2017-1-13 13:51
经验也只是说可以使用和计数同步，没说凭经验不需要计数。你的新鲜菌液有效期是1个月，这个就不好说了。你 ...

，你们是怎么做的，菌液会使用多久，我现在是每次使用都要先增菌。

青梅竹马 · 发表于 2017-1-17 12:09:48

还有，微限验证加菌量：1：10供试液（共10ml），加菌液0.1ml(含菌量10000)，为什么加菌液0.1ml不是(含菌量1000)？

juanx · 发表于 2017-1-17 12:21:06

青梅竹马发表于 2017-1-17 12:09
还有，微限验证加菌量：1：10供试液（共10ml），加菌液0.1ml(含菌量10000)，为什么加菌液0.1ml不是(含菌量1 ...

那你描述的菌液就应该是工作菌种了。我理解的菌液就是增菌培养好下一步直接稀释计数的。
如果加入的菌含量1000cfu/ml，0.1ml。加菌量为100cfu/10ml
那么你计数出来1ml就只有10cfu，这样回收率的可信度就低了，不过我们一般会写含菌量为10000~1000cfu/ml

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