EK酶(肠激酶)宿主蛋白残留HCP

hangzhouhdjy

你好，请教一下：


我在检测EK酶(肠激酶)的宿主蛋白残留HCP，发现用样品稀释液对EK酶进行不断地稀释，其HCP检测值越来越高，最终会使得HCP逐渐超过内控标准(0.1%)。
注：0.1%是EK酶的宿主蛋白浓度ng/ml与EK酶蛋白浓度mg/ml的比值。比如：1mg样品中，0.1%的HCP是1μg，即1000ng。


请问，这种情况是怎么回事？麻烦有经验的朋友指导一下，谢谢。


EK酶的宿主是毕赤酵母(Pichia Pastoris)
检测用试剂盒为Pichia Pastoris HCP ELISA Kit(第一代试剂盒)，厂家：CYGNUS，货号：F140
检测用样品稀释液为Sample Diluent Buffer，厂家：CYGNUS，货号：I028


当EK酶上样浓度为0.5mg/ml时，其HCP检测值12.3ng/ml。即0.5mg样品里有12.3ng的HCP，换算成1mg时，HCP为24.6ng。
当EK酶上样浓度为0.1mg/ml时，其HCP检测值26.1ng/ml。即0.1mg样品里有26.1ng的HCP，换算成1mg时，HCP为261ng。
当EK酶上样浓度为0.05mg/ml时，其HCP检测值36.4ng/ml。即0.05mg样品里有36.4ng的HCP，换算成1mg时，HCP为728ng。

药强

继续稀释，直到他浓度开始降低。你是不是没做最佳稀释倍数？