细胞培养

hott888 · 发表于 2022-8-8 10:35:04

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各位大神，图片中黑色的斑点是不是染菌了呀，是啥子菌，这细胞还能拯救不？

木子寒泪 · 发表于 2022-8-8 13:05:27

看着不像染菌了，可以的话，取出部分离心重悬后再培养。

张寅 · 发表于 2022-8-10 09:32:53

问了同事，有可能是霉菌，如果是霉菌就比较麻烦，这瓶细胞肯定不能用了，培养箱，房间，都要消消毒了吧，防止霉菌飘到其他地方去。

PGYPGYPGY2021 · 发表于 2022-8-14 10:16:02

是台盼蓝染色吗？如果是，你把染料过滤了再试试

hott888 · 发表于 2022-8-17 16:57:30

张寅发表于 2022-8-10 09:32
问了同事，有可能是霉菌，如果是霉菌就比较麻烦，这瓶细胞肯定不能用了，培养箱，房间，都要消消毒了吧，防 ...

不清楚，我取了一下培养液来培养，没有长菌，培养箱也擦拭取样培养，也没有长菌，好奇怪

hott888 · 发表于 2022-8-17 16:58:06

PGYPGYPGY2021 发表于 2022-8-14 10:16
是台盼蓝染色吗？如果是，你把染料过滤了再试试

不是的，显微镜下观察就是这样子的

hott888 · 发表于 2022-8-17 16:59:33

木子寒泪发表于 2022-8-8 13:05
看着不像染菌了，可以的话，取出部分离心重悬后再培养。

消化重悬几次了，还是弄不干净，不好操作

Woniumanmanpa · 发表于 2022-8-19 15:33:10

是用了血清吗，如果是换换血清，或者过滤血清试试。

womeng8201028 · 发表于 2022-8-30 11:53:21

看着确实像杂质，不是染菌，以后再染色的时候过滤过滤试剂再用。

张响 · 发表于 2022-9-4 11:05:49

检查思路
1.杂质影响视野
1.1.检查计数板是否是重复用未清洗干净；
1.2.如不是，应检查台盼蓝是否是经过盘式滤器过滤（这种情况遇见较多）；
2.受到污染
2.1结合扩培代次、培养天数和计数结果判断是否异常于同规模往批数据；
2.2取样送检
2.3回顾操作，检查可能的染菌风险点

张响 · 发表于 2022-9-4 11:08:05

张响发表于 2022-9-4 11:05
检查思路
1.杂质影响视野
1.1.检查计数板是否是重复用未清洗干净；

跟进过研发和中试，你这是不是计数板板底没清洗干净或台盼蓝未过滤造成存在杂质可能性较大

hott888 · 发表于 2022-9-14 17:08:28

张响发表于 2022-9-4 11:05
检查思路
1.杂质影响视野
1.1.检查计数板是否是重复用未清洗干净；

培养皿直接镜检下的照片，不是细胞计数板，也没有染色

友人A123 · 发表于 2022-9-15 13:41:30

虽然很晚了，但还是要问一下,请问这批细胞每一天都用细胞计数仪计数了吗？涨势怎么样，如果一直涨的不好的话有可能是支原体感染

jssben · 发表于 2022-9-19 15:08:59

谢谢楼主分享!!!

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