蒲公英 - 制药技术的传播者 GMP理论的实践者

搜索
查看: 343|回复: 5
收起左侧

细胞株筛选,Pool细胞fed-batch过程中titer D5后逐渐下降

[复制链接]
药徒
发表于 2023-2-3 22:18:46 | 显示全部楼层 |阅读模式

欢迎您注册蒲公英

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册

x
补充:摇瓶培养,中间过程每天有补料和补糖。分子为单抗。
什么原因?
回复

使用道具 举报

发表于 2023-2-24 09:49:17 | 显示全部楼层
可以考虑蛋白不稳定原因,比如形成多聚体沉淀,可溶性蛋白浓度自然就会越来越低。可能也有其他原因,不过就要对细胞或者上清进行检测具体分析了。

点评

看SEC有一点聚体,不到2%,这是能测出来的。如果有聚体沉淀,那这问题比较大。有没有什么办法能得到培养液总蛋白,或分离出蛋白?  详情 回复 发表于 2023-2-25 12:39
好,收到,谢谢!  详情 回复 发表于 2023-2-25 11:21
回复

使用道具 举报

药徒
 楼主| 发表于 2023-2-25 11:21:33 来自手机 | 显示全部楼层
陈凯1234567 发表于 2023-02-24 09:49
可以考虑蛋白不稳定原因,比如形成多聚体沉淀,可溶性蛋白浓度自然就会越来越低。可能也有其他原因,不过就要对细胞或者上清进行检测具体分析了。

好,收到,谢谢!
回复

使用道具 举报

药徒
 楼主| 发表于 2023-2-25 12:39:23 来自手机 | 显示全部楼层
陈凯1234567 发表于 2023-02-24 09:49
可以考虑蛋白不稳定原因,比如形成多聚体沉淀,可溶性蛋白浓度自然就会越来越低。可能也有其他原因,不过就要对细胞或者上清进行检测具体分析了。

看SEC有一点聚体,不到2%,这是能测出来的。如果有聚体沉淀,那这问题比较大。有没有什么办法能得到培养液总蛋白,或分离出蛋白?
回复

使用道具 举报

发表于 2023-3-1 16:07:49 | 显示全部楼层
PGYPGYPGY2021 发表于 2023-2-25 12:39
看SEC有一点聚体,不到2%,这是能测出来的。如果有聚体沉淀,那这问题比较大。有没有什么办法能得到培养 ...

聚体2%应该不至于会引起titer明显下降。你的样品应该是上清液吧,还有一种可能,那就是有些高聚体已经形成不容物,离心沉淀下来了?如果要验证的话,可以看看沉淀中除了细胞,是否有些其他的不规则大小的颗粒。可以用显微镜粗略看看,也可以跑个胶看看。

点评

样品是上清。 想法很好!我们去用显微镜看看,跑胶试试。  详情 回复 发表于 2023-3-2 21:08
回复

使用道具 举报

药徒
 楼主| 发表于 2023-3-2 21:08:57 来自手机 | 显示全部楼层
陈凯1234567 发表于 2023-03-01 16:07
聚体2%应该不至于会引起titer明显下降。你的样品应该是上清液吧,还有一种可能,那就是有些高聚体已经形成不容物,离心沉淀下来了?如果要验证的话,可以看看沉淀中除了细胞,是否有些其他的不规则大小的颗粒。可以用显微镜粗略看看,也可以跑个胶看看。

样品是上清。
想法很好!我们去用显微镜看看,跑胶试试。
回复

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

×友情提示
1、无权下载附件会员可能原因:1.“待验证用户组“,请点击注册邮箱里面收到的确认邮件即可; 2.作者设定权限的,提高用户组级别即可
2、对本站的任何疑问或合作需求,请联系微信tank066,关于怎样提高用户组/积分:https://www.ouryao.com/thread-6764-1-1.html
3、注册用户在本社区发表、转载的任何作品仅代表其个人观点,不代表本社区认同其观点。
4、如果存在违反国家相关法律、法规、条例的行为,我们有权在不经作者准许的情况下删除其在本论坛所发表的文章。
5、所有网友不要盗用有明确版权要求的作品,转贴请注明来源,否则文责自负。

关闭

站长推荐上一条 /1 下一条

QQ|手机版|蒲公英|ouryao|蒲公英 ( (京)-非经营性-2014-0058 京ICP备14042168号 京ICP证150354号 )

GMT+8, 2023-4-2 19:58

Powered by Discuz! X3.4运维单位:苏州豚鼠科技有限公司

Copyright © 2001-2020, Tencent Cloud.

声明:蒲公英网站所涉及的原创文章、文字内容、视频图片及首发资料,版权归作者及蒲公英网站所有,转载要在显著位置标明来源“蒲公英”;禁止任何形式的商业用途。违反上述声明的,本站及作者将追究法律责任。
快速回复 返回顶部 返回列表