无菌检查

ai华康

想请教各位老师，我们在做无菌检查时供试品阳性加菌种的试管做了两管，其中一管长菌，一管未长？什么原因？

逸清草堂

加的什么菌加的什么培养基

猫星人

可能由以下几个原因引起：

1、操作失误：可能是加菌操作时的不一致性导致，比如一管中成功接种了菌种，而另一管因操作不当（如接种量不足、接种位置不当或接种针灭菌不彻底等）未能成功接种。
2、菌种活力问题：使用的菌种可能存在活力差异，一管中的菌种保持了较好的活性并成功生长，而另一管中的菌种可能活力较低或已部分失活，因此未能生长。
3、培养条件差异：虽然两管理论上应置于相同的培养条件下，但微小的温度、湿度或气体环境的差异也可能影响菌种的生长，导致生长结果不同。
4、培养基问题：尽管是同时制备的两管培养基，但可能存在微小的质量差异，如pH值、营养成分分布不均等，影响了菌种的生长。
5、污染或抑制因素：未长菌的管可能受到了意外的化学或物理因素的污染，或者存在未知的抑制物质，抑制了菌种的生长，而另一管则未受影响。
遇到这种情况，需要根据具体实验步骤、操作记录和实验室条件进行细致的回顾分析，必要时重复实验以确认问题所在，并对实验流程进行相应的优化或调整，确保无菌检查的准确性和可靠性。此外，实验中设置阴性对照和阳性对照的重要性，以便于区分是实验本身的误差还是供试品的问题。

ai华康

猫星人 发表于 2024-5-27 11:02
可能由以下几个原因引起：

1、操作失误：可能是加菌操作时的不一致性导致，比如一管中成功接种了菌种， ...

老师，你好，我们实验中也设置了阴性对照和阳性对照，阴性对照无菌生长，阳性对照菌正常生长，只有这个供试品+菌种组是做了两管，一管长，一管未长；另外我们菌种用的是同一支定量菌种稀释而来的，菌种活力应该是一样的吧？

ai华康

逸清草堂 发表于 2024-5-27 11:02
加的什么菌加的什么培养基

加的金葡菌，是FTM和TSB，这两种培养基都是一管长一管不长

猫星人

不能明确具体是哪个环节出错了，只能去排查，以下是几个方面的原因，供你参考去寻找答案：
1.操作差异：尽管菌种来自同一支定量稀释液，但在添加到两管供试品时可能存在细微的操作差异，比如菌液分配不均，导致一管菌液量足够支持生长，而另一管菌液量过少不足以观察到生长。
2.供试品干扰：供试品本身的性质可能导致了菌种生长的不一致性。例如，供试品中可能含有某种成分，其浓度或分布不均，对菌种的生长产生了抑制效果，仅在其中一管中表现出来。
3.混合不均匀：在向供试品中添加菌液后，如果混合不充分，可能导致菌液在其中一管中未能均匀分布，影响菌种的生长。
4.容器或管子问题：虽然不太常见，但理论上也不能排除两支试管存在微小差异，比如内壁涂层、清洁度或微小裂纹等，影响了菌种的附着和生长。
5.意外污染或抑制：一管可能在操作过程中意外受到其他物质的污染，或者是之前处理过程中留下的残留物对菌种产生了抑制作用。
建议重新检查实验操作的每一个细节，包括菌液的制备、分装、加入到供试品中的操作步骤，以及供试品的预处理和混合方式。如果可能，可以尝试重复实验，特别注意操作的一致性和精确性，进一步就是考虑是否存在可能影响微生物生长的成分或条件。

ai华康

猫星人 发表于 2024-5-27 13:49
不能明确具体是哪个环节出错了，只能去排查，以下是几个方面的原因，供你参考去寻找答案：
1.操作差异：尽 ...

1.非常感谢大佬的分析，我也学习到了很多，能不能添加个你的联系方式，感觉你在无菌检查这块很有经验，我们互相交流学习，我的手机号为15093128956
2.我们也是想着分析一下可能的原因在哪里，再做一次重复试验看看，想把试验细节把控到位，这样可以排除一些操作误差！

ai华康

猫星人 发表于 2024-5-27 13:49
不能明确具体是哪个环节出错了，只能去排查，以下是几个方面的原因，供你参考去寻找答案：
1.操作差异：尽 ...

另外，金葡在培养基中是悬浮生长的是不是就排除了管子裂纹、涂层等问题