小型无菌液氮罐，B级区物料低温转入

蒲公英654850778

需要将冻存细胞在低温状态下转入B级区域，不能使用VHP消毒。有推荐说可以在一般区从液氮罐取出冻存管，迅速放入 小型无菌液氮转运罐，转运罐外层用 无菌袋 包裹，表面酒精消毒。通过 快速传递窗（减少液氮挥发）进入B级区。请问这种方式各位有人用过吗？无菌液氮罐怎么做到无菌呢？充入的液氮怎么做到无菌呢？

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不了解帮顶一下吧        

敬轩

我感觉细胞治疗产品，本质上不适合B+A，隔离器和一次性密闭系统是出路

pxh1

干冰转运呢

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姣妹崽

敬轩 发表于 2025-8-13 11:44
我感觉细胞治疗产品，本质上不适合B+A，隔离器和一次性密闭系统是出路

现在有一个声音是，如何证明你使用的是一次性密闭系统，生产前后如何证明系统的密闭性

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自己选择一种最适合的方式去验证呗  合适就用不合适就改呗

敬轩

姣妹崽 发表于 2025-8-13 13:42
现在有一个声音是，如何证明你使用的是一次性密闭系统，生产前后如何证明系统的密闭性

作为用户，只能等新的监管要求和耗材企业的进步了，其实冻存制剂还算相对安全，批量小

故障代号007

我也很好奇液氮罐怎么做到无菌的

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世间始终你好

你提的这个问题很关键，细胞冻存管低温转运到 B级洁净区，常见的难点就是：
1）容器如何做到无菌，2）液氮如何保证无菌。
我帮你梳理一下目前行业里常见的合规做法和思路：

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1. 无菌液氮罐（转运罐）如何做到无菌

• 罐体处理：
  
  
  • 小型转运罐一般在首次使用前需要彻底清洁、灭菌（可行方法是湿热灭菌或高水平消毒，或者在A级环境内经过VHP处理——但你说不能用VHP，那就只能靠灭菌级清洗+无菌装配）。
    
  • 使用过程中保持专用，不与非洁净区的液氮罐交叉。
    
    
• 使用方式：
  
  
  • 常见做法并不是让转运罐内部完全“无菌”，而是采取 “外部隔离+内层保护” 的策略：
    
    
    • 转运罐内本身可能不是绝对无菌的，但冻存管/细胞袋会装在 双层或三层无菌保护包装 中（内层无菌袋 + 外层一次性保护袋），确保即使液氮不无菌，冻存管也不直接接触。
      
    • 这样可以把“转运罐无菌”的难题转化为“冻存容器多层保护”的可控措施。
      
      

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2. 液氮如何保证无菌

• 液氮本身：工业/实验用液氮通常不是无菌的，甚至可能带有颗粒和微生物（冷冻状态下活着）。所以直接认为“液氮无菌”是不现实的。
  
• 行业应对办法：
  
  
  • 有些细胞库/生产企业会使用 “气相液氮” 而非“液相液氮”，因为气相接触风险小。
    
  • 冻存袋/冻存管都是 双层或三层包装，即使液氮不无菌也避免直接污染。
    
  • 部分 GMP 细胞企业会在液氮补充管路前加 除菌过滤器（0.1 μm 级别），但这也仅能降低风险，并不能让整个液氮“100%无菌”。
    
    

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3. 快速传递窗 & 酒精消毒

• 你的方案里提到：
  
  
  • 转运罐外层用无菌袋包裹 → 表面酒精消毒 → 快速传递窗进入B级区。
    
  • 这基本符合多数企业的“过渡策略”，关键是确保罐外层清洁可控，进入B级时不会带入颗粒/微生物。
    
    
• 风险点在于：
  
  
  • 液氮罐表面容易结露，酒精消毒的效果要确认。
    
  • 快速传递窗需要确认不会因液氮蒸发导致压差、冷凝水对洁净度控制有影响。
    
    

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4. 参考实践

• 很多 GMP 细胞企业并不追求“无菌液氮”，而是靠 双层包装 + 气相液氮 + 外层消毒 来满足监管要求。
  
• 欧盟和中国药典指导原则中，核心是 避免产品直接暴露于潜在污染源，而不是强行让液氮绝对无菌。
  
• 如果写进SOP，通常表述是：
  
  
  • 冻存管在双层包装下从液氮罐取出 → 放入专用小型转运罐 → 转运罐外层进行消毒处理 → 通过传递窗进入B级 → 在A级环境内解冻或拆包。
    
    

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总结：

• 无菌液氮罐：现实中几乎没有“真正无菌液氮罐”，合规做法是多层包装保护冻存管，罐体只需要表面清洁消毒，内部只要不直接接触到无菌包装层即可。
  
• 无菌液氮：工业液氮不可保证无菌，行业共识是通过气相液氮 + 多层无菌包装来规避风险，而不是依赖液氮灭菌。
  
  

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Minper

一般区取出放入的话，不管怎么对液氮罐外表面消毒，里面都是无法消毒的，细胞表面周围也无法消毒，直接带入B级取出的时候污染风险大。
个人觉得比较保守的方法是在C级进行复苏，如果存在VHP快速灭菌可以使用，如果没有的话在传递窗中进行浸泡或者对冻存细胞进行表面消毒程序进入B级，B级清洁进入BSC再进行一次消毒程序。