如何验证无菌设备最长允许存放时间

大呆子

蒲友提问：


无菌工艺过程中暴露的无菌产品及相关无菌组件和设备的最长允许存放时间。


这个怎么验证？

栗子7

单独做，或跟APS一起做

wsx

灭菌之后到预定的时间擦拭表面或者冲洗腔室进行微生物检查？

wzzz2008

应该是和无菌工艺模拟同步做？

世间始终你好

无菌工艺过程中**“暴露的无菌产品及相关无菌组件和设备的最长允许存放时间”**
其实是对 Hold Time（保持时间） 的确认，目的是证明：
在无菌环境下短暂停留（如中间等待、工序衔接、班次交接等）不会引入微生物或颗粒污染，且不会影响产品质量。
我帮你分成几个层次讲，方便你直接落地执行。

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1. 法规/指南依据

• 中国药典 2025版（四部《无菌检查法》附录）
  提到无菌工艺各环节需要确认保持时间的合理性。
  
• EU GMP Annex 1 (2022版) 4.11、8.52：
  对暴露时间有要求，需验证支持，避免微生物风险。
  
• PDA TR No. 22 / TR No. 78：
  给出无菌保持时间（Aseptic Hold Time）验证的思路。
  
• FDA Guidance for Industry – Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing
  要求验证中间产品在特定时间内保持无菌的能力。
  
  

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2. 验证对象可分两大类：

• 产品相关
  
  
  • 已经灭菌、准备进入下一步工艺的中间产品（如已灭菌的培养基、无菌配液、分装液等）
    
  • 暴露在A级/B级环境中的无菌原液、半成品
    
    
• 设备/组件相关
  
  
  • 灌装机的无菌部件（针头、管路、转子等）
    
  • 已经灭菌、等待使用的容器、器具（如传递进A级区的瓶塞、瓶体）
    
  • CIP/SIP 结束后保持状态下的设备
    
    

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3. 验证思路分为微生物保持验证和理化性质保持验证两方面：
3.1 微生物保持验证（核心）目的：证明在规定的最大暴露时间内不会发生污染
方法：

• 在实际暴露条件下（或模拟最差条件）放置样品/组件
  
• 对暴露时间设置多个梯度（如 0h, 4h, 8h, 12h, 24h …）
  
• 样品在暴露后按无菌检查法检测
  
• 对设备/组件可进行表面微生物采样（接触碟/拭子法）
  
• 必须在最差环境下验证（温湿度、班次、人员负荷、开启次数等）
  
  

3.2 理化性质保持验证（产品质量）目的：确保暴露时间不会引起产品理化性质变化
方法：

• 在最大暴露时间后检测关键质量指标（pH、效价、含量、粒径、可见异物等）
  
• 对缓冲液、培养基等，可重点检测理化稳定性和无菌性
  
  

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4. 验证方案设计关键点

• 模拟实际最差条件
  
  
  • 最大人员数量、最大操作频率
    
  • 最长预期等待时间（工艺延误时）
    
    
• 时间梯度选择
  
  
  • 常用 0h（对照）、工艺设计时间、设计时间×2、预估极限时间
    
    
• 批次数量
  
  
  • 一般 ≥3 批（确保数据可重复）
    
    
• 判定标准
  
  
  • 无菌检查合格（0/3 阳性）
    
  • 理化指标与初始值差异在可接受范围内
    
    
• 记录实际条件
  
  
  • 环境级别、温湿度、操作记录、人员数量
    
    

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5. 输出文件

• 《无菌保持时间验证方案》
  
• 原始检测记录（无菌检查 & 理化检测）
  
• 环境监测结果
  
• 《无菌保持时间验证报告》：明确最大允许存放时间，并纳入SOP或批记录要求
  
  

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经验小贴士：

• 如果是短时间（如≤8h）且环境A级稳定、无人员频繁进入，可以用培养基模拟灌装（Media Fill）数据作为支撑，减少额外验证。
  
• 对于组件（如已灭菌的瓶塞）可以结合BI（生物指示剂）或表面微生物采样做确认。
  
• 一定要考虑“开盖次数”“转运次数”等人为因素，它们对保持时间影响很大。
  
  

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19812340037

和无菌工艺模拟验证一起做，模拟放置最长时间，组件拆包后暴露放置最长时间，组件安装最长时间等等，其他都同理

tianyu0188

模拟生产验证时候确定

18943082964

同步无菌工艺模拟，然后阶段性测试微生物

清空uv9

关键时限：清洗后≤1小时包装，灭菌后按材质定有效期（14天~180天），灌装等暴露≤8小时。

核心方法：
→ 微生物挑战试验（有效期验证） + 最差条件模拟（清洗/灌装时限） + 培养基模拟灌装（全过程覆盖）。

合规依据：符合GMP附录1、WHO TRS 992、ISO 13408等对“时限验证需覆盖最差条件”的要求。

胖丁

同步无菌工艺模拟，然后阶段性测试微生物

机智鼠

作为药学和医疗器械领域专家，针对无菌设备最长允许存放时间的验证，建议采用以下专业方法：

1. **微生物负载监测**：在设定的不同时间点（如2/8/16/24小时）对设备表面进行擦拭取样培养，若菌群数量稳定且符合限值标准，则可判定该时段为有效期限；

2. **残留物检测**：通过HPLC等分析技术确认活性成分及清洁剂无超标残留；

3. **环境模拟试验**：结合加速老化原理，在温湿度调控条件下观察材料性能变化；

4. **包装完整性测试**：确保密封系统在整个周期内维持屏障功能。

需同步记录数据并依据《无菌医疗器械》等规范进行趋势分析，最终确定科学合规的存放时限。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

韧如水

一般是和无菌工艺验证的时候一起做

胜利者

有道理