色谱峰拖尾、前沿的原因及解决方案

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在使用对照品进行色谱检测时，色谱峰拖尾或前沿会严重影响定量的准确性和分离度。以下从几个方面为您剖析原因及解决方案：

溶剂效应：

原因：对照品溶剂强度大于流动相强度，可造成的色谱峰前沿、分叉或出现异常峰。

解决方案：使用与流动相初始比例极性相当的溶剂溶解对照品、或降低进样量。

对照品溶解不充分：

原因：未完全溶解的对照品或微小颗粒在进样后，会在色谱柱中缓慢溶解，持续被流动相洗脱出来，导致拖尾。

解决方案：充分振摇、超声助溶或添加助溶剂（DMSO等），确保对照品完全溶解；在进样前使用 0.22 μm 或 0.45 μm 的微孔滤膜过滤样品溶液，去除可能存在的微小颗粒或杂质。

对照品不稳定：

原因：对照品在溶剂中发生了降解，降解产物可能与主成分共洗脱，导致峰形拖尾、展宽。

解决方案：通过对比对照品溶液放置前后的峰面积和峰形变化判断对照品溶液的稳定性，若确定为不稳定，则需现配现测，或更换溶剂，规避不稳定性因素。

对照品纯度不足：

原因：对照品的杂质与主成分分离度不佳，共洗脱导致峰形拖尾或前沿。

解决方案：换另一品牌或批次对照品进行对比实验；优化色谱条件尝试分离；使用LC-MS确认峰中是否含有不同质荷比的离子，判断是否存在杂质。

样品过载：

原因：对照品浓度过高或进样体积过大，可能会超过色谱柱的最大载样量，导致部分对照品无法在色谱柱中充分保留，提前流出，形成前沿峰。

解决方案：降低对照品浓度或减少进样量。

对照品污染：

原因：配制过程中出现的失误或者污染，导致污染物与主成分共流出，形成前沿或者拖尾峰。

解决方案：排查配制过程中的量器、容器、溶剂等，避免交叉污染。

流动相pH值不匹配：

原因：当pH值不适当时，对照品与固定相的相互作用不均匀，导致部分分子提前或延迟流出，形成前沿峰或拖尾峰。

解决方案：调节pH值，让硅醇基或对照品保持中性，消除离子的相互作用。如碱性化合物可用pH2-4的流动相来抑制硅醇基解离、酸性化合物可用pH2-4的流动相来抑制酸性化合物的自身解离。

色谱柱问题：

原因：长期使用后的色谱柱可能出现填料塌陷、污染等问题，导致固定相吸附点位不均匀，从而影响对照品的保留和分离，产生拖尾或前沿峰。

解决方案：选择过往检测峰形较好的样品复验，或使用色谱柱厂家推荐的柱效测试方案进行验证，如明确为柱效下降可尝试色谱柱再生或更换新的色谱柱。

柱温过低：

原因：柱温设置过低，会使流动相粘度增加，对照品在柱内的扩散和传递速度变慢，可能会导致峰前沿。

解决方案：适当提高柱温。

系统死体积过大：

原因：色谱系统管路过长、接头不匹配、流通池或进样阀体积过大等，都会导致样品在柱外区域滞留和扩散，形成额外的死体积，影响峰形对称，导致前沿。

解决方案：缩短管路、更换适宜的接头和部件，减少死体积

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