2025药典无菌方法适用性检查

棒棒爹

有大佬能不能解释下菌种及菌液制备：对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌代替铜绿假单胞菌。很纠结到底选用大肠还是铜绿。按照25是不是要重新做方法适用性选用铜绿去代理大肠?

环湖

选用大肠                           

世间始终你好

你这个问题非常关键，涉及到药典规定与实际检测可行性的平衡，我们来系统理一遍。

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一、背景条文依据（2025版药典）2025版《中国药典》四部（微生物限度检查法、抗生素类制品专论）中对**“菌种及菌液制备”**部分有明确指导：

对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品，宜选用大肠埃希菌代替铜绿假单胞菌进行方法适用性试验。

也就是说，这句话是出自药典正文的“推荐性”表达——“宜选用”并非“应选用”。

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二、为什么提出这个替代建议？因为：

• 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）对多数β-内酰胺类、氨基糖苷类等抗生素天然耐药；
  
• 而大肠埃希菌（Escherichia coli）对这类抗生素敏感；
  
• 所以在进行微生物限度法或抗生素残留、抑菌性评估等适用性试验时，如果供试品含抗生素成分，铜绿假单胞菌可能被完全抑制，无法体现方法回收率。
  
  

药典因此允许并建议，在这种情况下使用大肠埃希菌替代铜绿假单胞菌。

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三、是否需要“重新做方法适用性”？关键看你原方法的适用性验证对象和使用目的：
情况是否需重新做适用性验证说明
原先按照药典常规菌种（含铜绿）做的适用性，结果显示供试品对铜绿有抑制作用 需要重新做因为原菌株无法在供试品中生长，方法不适用
原方法中铜绿可正常生长（未被抑制） 可维持原方法保留铜绿即可，无需更换
新增抗生素或制剂中含抗菌成分 需重新做必须验证大肠埃希菌能在供试品体系中存活恢复生长

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四、监管与实践建议从检查和报告角度：

• 若你选用了大肠埃希菌替代铜绿假单胞菌，应在方法适用性报告或验证方案中说明理由：
  

  “本品为对铜绿假单胞菌具有抑制作用的抗生素类产品，根据《中国药典》2025版四部通则1105要求，选用对该产品敏感的大肠埃希菌替代铜绿假单胞菌进行方法适用性试验。”
  

• 同时保留菌种更换的风险评估和验证数据（如回收率结果）。
  
  

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五、总结建议你的产品类型建议菌株是否需重做适用性
抗生素类，对革兰阴性菌敏感（如β-内酰胺类）大肠埃希菌 建议重做
非抗生素类、无抗菌活性铜绿假单胞菌不需变更
不确定是否有抑菌作用先用铜绿试，若被抑制再换大肠视结果而定

婵34f54f29

用大肠，药典写的挺清楚的啊
方法适用性的目的为了验证方法适用于该产品，尽可能的检测出产品的微生物可能存在的污染，产品对大肠敏感，说明大肠在这个产品里不容易生长。
使用大肠做方法适用性试验，通过了，则说明类似微生物的可能污染均能够被检测出来

婵34f54f29

对大肠敏感，大肠适用性通过了，铜绿肯定没问题

不见猫骨头

对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌；其它的用铜绿

棒棒爹

世间始终你好 发表于 2025-10-15 09:34
你这个问题非常关键，涉及到药典规定与实际检测可行性的平衡，我们来系统理一遍。

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一、背景条文依据（ ...

老师是这个样子的，我们之前做产品方法适用性检测按照药典2020进行薄膜过滤法（菌种为金葡、生孢梭菌、大肠、枯草、白念、黑曲）现在面临的问题根据字面意思对抗生素敏感的选用大肠去做，其余用铜绿，有没有这种解释在没有抗生素类的情况下大肠、和铜绿都可作为无菌方法适用性检测，二选一即可。

棒棒爹

世间始终你好 发表于 2025-10-15 09:34
你这个问题非常关键，涉及到药典规定与实际检测可行性的平衡，我们来系统理一遍。

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一、背景条文依据（ ...

我们是3类的医疗器械产品

棒棒爹

不见猫骨头 发表于 2025-10-15 12:59
对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌；其它的用铜绿

老师是这个样子的，我们是3类医疗器械非抗生素类，之前做产品方法适用性检测按照药典2020进行薄膜过滤法（菌种为金葡、生孢梭菌、大肠、枯草、白念、黑曲）现在面临的问题根据字面意思对抗生素敏感的选用大肠去做，其余用铜绿，有没有这种解释在没有抗生素类的情况下大肠、和铜绿都可作为无菌方法适用性检测，二选一即可。

依然星期三

本次药典菌种的调整目的是最大原则上与美国药典（USP）和欧洲药典（EP）的标准保持一致，降低国际申报差异，同时减少企业检测成本，但依旧保留了对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌的要求。铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和大肠埃希氏菌（Escherichia coli）都属于革兰氏阴性菌的典型代表。大肠埃希氏菌对抗生素（尤其是头孢类）的敏感性显著高于铜绿假单胞菌，后者因属于假单胞菌属，对多种抗生素（如β-内酰胺类）敏感性低，存在天然耐药性。在方法适用性试验中，若使用耐药性强的铜绿假单胞菌，可能无法准确检出供试品的抑菌活性，导致假阴性风险；而大肠埃希氏菌作为敏感指示菌，能更严格地验证抑菌性消除方法的有效性，在抗生素类产品的方法适用性中选择大肠埃希菌更容易考察出供试品的抑菌性。在非抗生素产品中铜绿假单胞菌与大肠埃希氏菌敏感性相似，都能作为革兰氏阴性菌代表，对方法适用性试验不会有显著的差异。

世间始终你好

棒棒爹 发表于 2025-10-15 14:19
老师是这个样子的，我们是3类医疗器械非抗生素类，之前做产品方法适用性检测按照药典2020进行薄膜 ...

你的理解非常到位，而且这个问题——“非抗生素类产品的大肠 vs 铜绿菌是否可二选一”——确实是很多企业在药典2025版过渡期遇到的核心问题。下面我给你一个监管一致、可操作、能写进报告的权威解释路径。

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一、你当前的情况总结

• 产品：三类医疗器械（无菌类）；
  
• 检验项目：无菌检查/方法适用性试验；
  
• 方法：薄膜过滤法；
  
• 按2020版药典做过适用性（菌株：金葡菌、梭菌、大肠、枯草、白念、黑曲）；
  
• 现依据2025版药典，出现“大肠 vs 铜绿”的菌种选择疑义。
  
  

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二、药典2025版的原文逻辑在《中国药典》2025版四部通则 1101（无菌检查法）和通则 1105（微生物限度检查法）中，关于“菌种选用”部分有以下要点：

对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品，宜选用大肠埃希菌代替铜绿假单胞菌。

解读关键词：

• “宜” = 推荐性用语，不是强制性；
  
• 语境限定：“对大肠敏感的抗生素类产品”；
  
• 推出逻辑：“非抗生素类产品”不在该推荐范围内。
  
  

因此——对于非抗生素类的医疗器械或化药制剂，并不强制使用大肠替代铜绿，两者是可等效选择的。

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三、监管与技术解释（建议写法）在无抗生素类产品中：

• 铜绿假单胞菌和大肠埃希菌均为革兰阴性杆菌代表；
  
• 二者在方法适用性试验中作用相同（均用于验证“能否检出革兰阴性菌”）；
  
• 因此在非抑菌产品中，可二选一。
  
  

推荐写法（适合写入报告或SOP）

本品为非抗生素类产品，不具抗菌活性。根据《中国药典》2025年版通则1101及1105关于菌种选用的规定，铜绿假单胞菌与大肠埃希菌均可作为革兰阴性菌代表菌株。考虑方法沿用性与结果稳定性，本方法适用性试验选用（铜绿假单胞菌/大肠埃希菌），不影响检测代表性和适用性。

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四、是否需要重新做验证？情况是否需重新做方法适用性
原2020版方法未变，产品非抗生素类 不需要
若监管部门要求按新版药典重新归档/复核方法 可复测确认一次，但选铜绿或大肠皆可
若产品含有抗生素、抑菌成分 需选大肠埃希菌并重做

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五、总结结论项目建议
产品类型三类无菌医疗器械（非抗生素类）
菌种选择铜绿假单胞菌 或 大肠埃希菌（二选一即可）
依据2025版药典通则1101/1105 推荐性条款，“宜选用”非强制
是否重做适用性无需，仅在成分或配方变更时复核
报告描述建议明确说明产品无抗菌成分，菌种选择符合药典精神与检测代表性要求

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一句话总结：
对于非抗生素类的三类无菌医疗产品，大肠埃希菌和铜绿假单胞菌均可作为革兰阴性菌代表进行方法适用性试验，二选一即可，不需要因为2025版药典修改而强制重做。

棒棒爹

世间始终你好 发表于 2025-10-15 19:47
你的理解非常到位，而且这个问题——“非抗生素类产品的大肠 vs 铜绿菌是否可二选一”——确实是很多企业 ...

老师好专业，受益匪浅（老师您是AI吗）

世间始终你好

棒棒爹 发表于 2025-10-16 09:57
老师好专业，受益匪浅（老师您是AI吗）

不是啊，复制粘贴于chatgpt

棒棒爹

依然星期三 发表于 2025-10-15 15:45
本次药典菌种的调整目的是最大原则上与美国药典（USP）和欧洲药典（EP）的标准保持一致，降低国际申报差异 ...

感谢老师受益匪浅

不见猫骨头

棒棒爹 发表于 2025-10-15 14:19
老师是这个样子的，我们是3类医疗器械非抗生素类，之前做产品方法适用性检测按照药典2020进行薄膜 ...

我的建议是对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌；对大肠埃希菌不敏感的抗生素类产品或者没有抗生素类的产品用铜绿，这样可以和USP、EP保持一致

lxiaof

对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌代替铜绿假单胞菌。意思是哪种菌敏感，就选哪种菌做方法适应性。

棒棒爹

lxiaof 发表于 2025-10-16 13:12
对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌代替铜绿假单胞菌。意思是哪种菌敏感，就选哪种菌做方法适 ...

我考虑的是产品不含有抗生素类是否大肠和铜绿任选其一，主要是想做方法适用性

棒棒爹

不见猫骨头 发表于 2025-10-16 13:00
我的建议是对大肠埃希菌敏感的抗生素类产品宜选用大肠埃希菌；对大肠埃希菌不敏感的抗生素类产品或者没有 ...

关键在我20版药典或者一些培训的课件，对无菌方法适用性全都选用的是大肠埃希菌，，，为了不去反复的去做方法适用性，在已知产品不是抗生素的情况下，大肠和铜绿可以任选就可以避免重复做方法适用性。

lxiaof

棒棒爹 发表于 2025-10-17 09:00
我考虑的是产品不含有抗生素类是否大肠和铜绿任选其一，主要是想做方法适用性

没特殊要求，可使用铜绿。这也是这版药典与20版药典改进的地方，将大肠移出方法适应性菌种，和美国药典一致

不见猫骨头

棒棒爹 发表于 2025-10-17 09:03
关键在我20版药典或者一些培训的课件，对无菌方法适用性全都选用的是大肠埃希菌，，，为了不去反复的去做 ...

确认你们的产品，如果没有出口的计划/规划，选择大肠也可以；或者只补做一个铜绿就可以了