无菌检测

天空的距离

新人刚学，求问：FTM液体培养基，接种细胞上清液时，轻微晃动会出现上层液体颜色变粉红的现象，后续培养会稍微褪色，变稍暗淡，这正常吗。

34f54f29

FTM变粉红，是被氧化了。晃动后将样品产生的氧气摇出来了吧

jinn512

34f54f29 发表于 2025-12-24 14:32
FTM变粉红，是被氧化了。晃动后将样品产生的氧气摇出来了吧

是晃动破坏了氧化层，重新接触空气中的氧气后开始形成新的氧化层

jinn512

正常的，你们买的应该是成品，不知道这个粉色咋来的。配制时刚加水的时候整体呈粉色，加热后，粉色消失，表示培养基里的氧气已经与氧化层反应完全。你晃动时，加速了氧气溶解到培养基，故发生反应，重新形成粉色的悬浊物

天空的距离

jinn512 发表于 2025-12-24 16:05
是晃动破坏了氧化层，重新接触空气中的氧气后开始形成新的氧化层

老师，那这种情况它后续还可以检测需氧菌吗？那在做检测时，滴加完样品后，怎么避免这种现象产生或者降低它的风险。

机智鼠

在无菌检测中，使用FTM液体培养基接种细胞上清液时，轻微晃动导致上层液体颜色变粉红，随后褪色并稍显暗淡，这一现象可能与多种因素有关。首先，这可能是正常的生理变化，因为某些细胞代谢产物或培养基成分在特定条件下可能会发生颜色变化。然而，为了确保实验结果的准确性和可靠性，建议进一步检查以下几点：

1. **培养基质量**：确认所使用的FTM液体培养基是否在有效期内，并且储存条件符合要求。过期或不当储存的培养基可能导致颜色变化。

2. **细胞状态**：检查接种的细胞是否处于健康状态。如果细胞受到污染或处于不良生长环境，其代谢产物可能会影响培养基的颜色。

3. **操作规范**：确保在接种过程中遵循了正确的无菌技术，以避免外部污染导致的颜色变化。

4. **环境因素**：考虑实验室环境中的温度、湿度等条件是否适宜，因为这些因素也可能影响培养基的颜色。

5. **文献参考**：查阅相关文献或指南，了解是否有类似情况的记录和解释。例如，可以参考《中国药典》中的无菌检查法指导原则，该指南提供了关于无菌检测的详细技术和标准。

综上所述，虽然轻微的颜色变化可能在某些情况下是正常的，但为了排除潜在的问题，建议对上述几个方面进行仔细检查。如果颜色变化持续存在或伴随其他异常现象，建议暂停实验并咨询经验丰富的同事或导师，以确保实验结果的准确性和可靠性。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

jinn512

可以呀，本身这个培养基就是为了减少氧气对你的培养物产生的影响，短暂的氧气接触也不大。如果一点氧化都不允许的话，那你们应该要有一个专门的充氮的隔离器去做实验和培养，而不是用这个培养基了，

天空的距离

jinn512 发表于 2025-12-24 16:31
可以呀，本身这个培养基就是为了减少氧气对你的培养物产生的影响，短暂的氧气接触也不大。如果一点氧化都不 ...

你好老师，我还有一个疑惑，就是在FTM培养基，进行滴加上清液时，是否需要对滴加后的培养基进行吹打混匀（颠倒），还是仅进行简单的左右转动，还是不进行只静置。

jinn512

一般来说，我们做细菌的是无所谓的，随便摇，毕竟细菌适应性强。你做细胞的话，其实可以用长一点的枪头把液体打到液面下，这样的话，可以在不摇培养基的情况下减少细胞与氧气的接触时间

羽遥

不用吹打混匀，滴加后轻轻左右转动让上清液均匀分布在培养基表面即可，避免剧烈颠倒导致培养基分层或氧气混入过多影响结果

火舞精灵

培养基里有一种成分叫刃天青，提供氧化层指示作用，使用培养基接种样品后要混匀，整管培养基都会变色，静置一段时间后，氧化层仅在上层显示，随着培养时间，氧化层会逐渐加深，药典上规定培养基使用前氧化层不超过培养基高度的三分之一，培养结束后不超过二分之一

不见猫骨头

正常；
取L-胱氨酸、琼脂、氯化钠、葡萄糖、酵母浸出粉和胰酪胨与水混合，加热溶解，加入硫乙醇酸钠或硫乙醇酸，必要时用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH，使灭菌后在25℃的pH值为7.1±0.2。如需过滤，可重新加热上述溶液，但不得煮沸，趁热过滤。加入刃天青溶液，混匀，分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/3，否则，须经水浴或流通蒸汽加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。（1101）