【信息分享】细胞实验经验讨论总结

zdlxcb · 发表于 2012-12-14 23:38:08

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本帖最后由 zdlxcb 于 2012-12-15 18:45 编辑

在细胞实验室，有很多经验很难总结在书本上，但是与整个实验的成功却密切相关，现在建立新贴，想到哪里说道哪，随时补充并建议高手随时添加内容，大家共享自己实验中积累的小窍门。
1）细胞冻存管一般有1.5-2ml左右体积，原则上可以存放1.5ml充满均匀悬浮细胞的冻存液，一些人喜欢灌注1-1.5ml冻存液冻存，这实际上并不好。原因如下：冻存液冻存需要一段时间，如果这段时间冻存管倾斜，液体容易流到管口，很容易在后续的操作中造成污染。建议0.5-1ml之间即可。
2）许多教科书推荐细胞解冻用37度水，本人发现温度可以适当提高，39度也没有问题，虽然只提高了2度，却可以加速细胞解冻的时间。解冻后有提点挺重要，迅速用75%乙醇消毒冻存管管口和双手，然后进入下一步工作，随时别忘无菌操作。
3）当无菌操作台经常有多人工作时，记住自己用时，尽量把各种实验用物在紫外灯下消毒30-40分钟，包括枪头，移液器，废液缸等容易忽略的物品。但是，不要让胰酶和培养液处在紫外灯照时下！
4）准备用实验台时，打开紫外灯的同时应打开鼓风机，如果操作太两边都有风机旋钮，应该保持两边风机风速一致，而且应该大于100，以免飞虫进入（当然不能吹灭酒精灯火苗）。最好再用75酒精蘸洁净一次性纸巾擦试所有可以消毒的地方，尤其是工作面。
5）如果不是通过两个圆孔进入手臂操作，而需要抬高操作台前置玻璃挡板，一般不要超过15厘米，主要目的还是减少污染几率。

zdlxcb · 发表于 2012-12-14 23:41:25

怎么会变成乱码了啊

longstory · 发表于 2012-12-15 00:57:44

呵呵，楼主是老人了吧

照射紫外时即打开风机，30min或者以上才能形成无菌层流，节省时间。
还有，超净台内用酒精灯是老式中式做法

，现在好多地方不用了。会产尘。而且，据说高效过滤器用久了会释放粒子，酒精灯易造成爆燃。

胜利者 · 发表于 2012-12-15 08:05:11

有意思

仲夏秋夜云 · 发表于 2012-12-15 16:52:12

longstory 发表于 2012-12-15 00:57
呵呵，楼主是老人了吧
照射紫外时即打开风机，30min或者以上才能形成无菌层流，节省时间。
还有，超净台 ...

超净台里放酒精灯还会造成火灾。因为很多东西是喷了酒精放到超净台里的，我的手就被烧伤过一次，带着手套，手套上喷了酒精……

仲夏秋夜云 · 发表于 2012-12-15 16:52:49

zdlxcb 发表于 2012-12-14 23:41
怎么会变成乱码了啊

因为格式问题……文件可以先倒到TXT文本里看看有没有格式标志码~

恒立国际-杨生 · 发表于 2012-12-15 17:00:18

了解一下，谢谢分享

乱码是因为是你从其它论坛复制过来的，有些论坛会加入乱码...

仲夏秋夜云 · 发表于 2012-12-16 17:29:11

仲夏秋夜云发表于 2012-12-15 16:52
超净台里放酒精灯还会造成火灾。因为很多东西是喷了酒精放到超净台里的，我的手就被烧伤过一次，带着手套 ...

是滴，手上起泡，现在还有疤……

仲夏秋夜云 · 发表于 2013-2-5 10:06:58

今日评分额度用完，明天来阳光普照

dasheng1980 · 发表于 2013-3-20 13:29:11

学习一下！谢谢！

乌衣衣 · 发表于 2017-10-26 20:46:56

新手上路，多多学习一下

pcp · 发表于 2018-1-4 14:18:58

现在的超净工作台的循环级别都挺高的，应该不会用到酒精灯了吧，毕竟使用酒精灯容易产生气溶胶等污染反而对工作台不好，不过这个也是针对一些比较好的超净工作台而言的

洛洛爱吃鱼 · 发表于 2018-2-10 15:28:43

谢谢分享，很多小技巧学习了！

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