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今天不知怎么搞的,既然睡不着,唉...上班时不想起来,休息了有睡不着!好了,闲话就不说了,回归正题——上次谈到胎牛血清的解冻及胎牛血清的沉淀的处理,今天来谈谈实验室该怎么选择血清以及如何来避免胎牛血清产生沉淀... 1、实验室如何选择适合的血清? 国内一致认为HYCLONE的血清是最好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,知名度不高,但是其实在国外已经做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE不相上下,但价格相对优惠很多。 2、 如何避免血清中产生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的产生:
(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
(4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
(5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
(6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 请大家继续关注后续的内容,关于胎牛血清在细胞培养过程中的一些问题,尤其是小黑点的形成,敬请关注下节分享...
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