关于标准曲线

hycwq77

用普析1810紫外可见光分光光度计进行异鼠李素标准曲线的制作。标准如下：
对照品溶液的制备：精密称取在100℃干燥至恒重的异鼠李素对照品适量，加无水乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液。

标准曲线的制备 ： 精密量取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml，分别置10ml量瓶中，各加1％三氯化铝无水乙醇溶液1ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以相应的试剂为空白，照分光光度法（《中国药典》2010年版一部附录V  A），在430nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

问题是：最后一个点的吸光度超过了1.0，为1.055，计算结果的R值为0.9999，这样的标准曲线能用吗？

咕咕

用这些数据做标曲有什么问题？

zwen5200

没什么问题啊

hycwq77

吸光度超过了1.0，为1.055，可不可以

结果

可以用呀！线性挺好的。

hongwei2000

紫外之所以药典规定适宜的检测吸收值范围在0.3-0.7之间
是因为紫外仪器本身的特点所决定的
一般说来
紫外在低吸收值处受噪音影响使检测结果偏高
而在高吸收处受杂散光影响使检测结果偏低
所以一般的线性曲线都会在Y轴上有一个正向的截距
但由于仪器本身性能差异
噪音和杂散光的影响也会有较大不同
你可以用校正曲线对各浓度进行回收
如果超出可接受范围（例如1%或2%）则该数据可能影响检测结果
否则应该可以使用
如果确有影响你可以使用窄池做线性和检测（例如0.5cm池）

Whats

应当进行OOS调查后再决定。

可亲可爱

1.055为什么就不行了呢?

hycwq77

标准曲线在Y车轴上为负向截距可以吗？数据如下 ：标准液浓度为（ug、ml）：1.98   3.96    5.94    7.92    9.90     11.88   对应的吸光度为：0.167   0.377  0.519   0.688   0.871   1.055    标准曲线计算结果为：y=0.0896x-0.0149    r值为0.9999    截距为负值可以吗？

hycwq77

标准曲线在Y车轴上为负向截距可以吗？数据如下 ：标准液浓度为（ug/ml）：1.98   3.96    5.94    7.92    9.90     11.88   对应的吸光度为：0.167   0.377  0.519   0.688   0.871   1.055    标准曲线计算结果为：y=0.0896x-0.0149 (以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标)   r值为0.9999    截距为负值可以吗？

hongwei2000

hycwq77 发表于 2014-3-24 15:45
标准曲线在Y车轴上为负向截距可以吗？数据如下 ：标准液浓度为（ug/ml）：1.98   3.96    5.94    7.92     ...

只要各点回收能够符合要求就没有问题
你可以分别计算一下
也就是把只收值带入到曲线中求出浓度
再除以理论浓度得到回收率
如果都能够在100%正负1.0%或2.0%（你们自己确定）就可以了
仪器越好理论上Y轴的截距就越小（绝对值）
而且标准曲线本身就是计算得出来的