关于ELISA空白的疑问

hangzhouhdjy

CYGNUS 的Pichia pastoris HCP ELISA Kit的质检报告中的检测指标中提到以下信息：Substrate Blank vs.H2O合格标准为<0.100(OD值)，检测结果是0.009。
请教：1、该检测结果是指Substrate Blank与H2O两者OD值的比值吗？2、能否解释一下Substrate Blank的具体意思？3、底物空白、酶标板空白、水的空白有什么不同（定义）？
拜谢各路大神

cnosema

把报告拍张照放上来吧，有的东西需要看一下上下文帮助理解

cnosema

请教：1、该检测结果是指Substrate Blank与H2O两者OD值的比值吗？

   估计是

2、能否解释一下Substrate Blank的具体意思？

   字面直译，就是底物空白。但是它怎么做的空白，如果有描述的话，就更容易理解一些。你买的这个板子，是夹心法ELISA吗，还是别的ELISA?

3、底物空白、酶标板空白、水的空白有什么不同（定义）？

   所谓空白，就是想知道这个ELISA反应的本底读数，即孔里没有样品时候的读数。因为反应板的封闭不可能达到100%，总是或多或少会有一些非特异性交叉反应，可能发生在每一步样品/试剂添加之后的保温过程中。把样品读数减去这些本底读数，得到的才是你想检测的东西产生的特异性读数。

   你操作过程中，每一步向板子里加东西的时候，都可以做一个空白孔出来（那个孔里不加相应的试剂就行）。但是某些空白孔，可能在板子包被的时候才能做出来。

cnosema

网上找了找，可能是说明书？

If the substrate has a distinct blue color prior to the
assay it may have been contaminated. If the
absorbance of 100&#61549;L of substrate plus 100&#61549;L of
stop against a water blank is greater than 0.1 it
may be necessary to obtain new substrate or the
sensitivity of the assay may be compromised.

看字面意思，水空白就是孔里直接加水，底物空白就是孔里加100微升底物和100微升停止溶液

hangzhouhdjy

cnosema 发表于 2018-5-25 21:55
请教：1、该检测结果是指Substrate Blank与H2O两者OD值的比值吗？

   估计是

该试剂盒是采用双抗体夹心法的ELISA。