无菌检测直接接种法的培养基数量

时间煮雨12

  请问直接接种法中，培养基的数量是按样品支数1:1的关系，还是可以合并样品进行检测？
  例如：供试品为5ml/支的液体制剂，采用直接接种法进行无菌检测时，按最小检测量，应该取20支供试品进行检测（阳性对照另计），按15版药典通则1101中所规定的“表3 供试品的最少检验量”取“半量但不得少于1ml”进行检验:

  A法、取供试品21支，每支供试品取2.5ml至25ml硫乙醇酸盐培养基中（满足接种量不大于培养基体积的10%），同一支供试品再取2.5ml至25ml胰酪大豆胨液体培养基中，共计20支硫乙醇酸盐培养基和20支胰酪大豆胨液体培养基，另外再加取一支供试品2.5ml加入25ml硫乙醇酸盐培养基，并添加规定量的金黄色葡萄球菌作为阳性对照（满足“阳性对照供试品用量同供试品无菌检查时每份培养基接种的样品量”），将上述培养基分别置于相应的温度下培养14天。观察结果，阳性对照于72小时内观察结果。（培养基数量分别为20+20+1份，培养基体积为硫乙醇酸盐培养基525ml/胰酪大豆胨液体培养基500ml）

  B法、取30支供试品，合并后得到150ml供试品溶液，将上述溶液取50ml至500ml硫乙醇酸盐培养基中，另取50ml至500ml胰酪大豆胨液体培养基中，剩余50ml至500ml硫乙醇酸盐培养基中并加入规定量的金黄色葡萄球菌作为阳性对照，将上述培养基分别置于相应的温度下培养14天，观察结果。（培养基数量为1+1+1份，培养基体积为硫乙醇酸盐培养基1000ml/胰酪大豆胨液体培养基500ml）

  问题1：在生产型企业，应选择哪种方法进行检测更加合规？
  问题2：阳性对照的观察是否在72小时内观察有菌后即可以处理掉，无需放置14天？
  问题3：对于直接接种法，目前市面上有没有通用型的培养基容器（类似薄膜过滤法中的集菌器）？

  本人没有做过无菌试验，上述描述仅来源于对药典和检验标准操作规范的理解，还望有相关经验的蒲友给予帮助和指导。不胜感激~！

田北七

1、个人觉得A法更加规范，如果用B法，长菌了只能说明这30支中存在菌，并不能具体到哪一支或是哪一批。
2、我们这边是在72小时内观察有菌后即可以处理掉，无需放置14天。
3、对于这个“培养基容器（类似薄膜过滤法中的集菌器）”，这个我不是很懂，不是应该用试管或是三角烧瓶吗？视培养基多少而定。
      一点见解，望能解惑

时间煮雨12

田北七 发表于 2018-7-20 08:42
1、个人觉得A法更加规范，如果用B法，长菌了只能说明这30支中存在菌，并不能具体到哪一支或是哪一批。
2、 ...

非常感谢您的解答个人认为用A法的优点是单一性检查，可以有效的排除一定的外来污染（合并供试品过程中引起的污染），但是弊端是培养基的数量就相应增多了，每一批产品就需要41支培养基，对于培养箱的体积又有了更高的要求。所以我才想了解一下其他厂家是怎么做的

时间煮雨12

请问还有没有其他前辈给提点建议呀？帖子不要沉呐~！

275025255

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顶一下上古题目，3问题我现在也有疑问