细菌内毒素干扰预实验请教

未来医药界大佬

求教大神，中国药品检验标准操作规范中关于内毒素干扰预实验举例，用0.25EU/mL的鲎试剂进行预实验，得出最小不干扰稀释倍数为20倍，但用0.25EU/mL鲎试剂最大有效稀释倍数应该为10倍，为什么规范中会说在稀释20倍的浓度下进行正式干扰试验呢？需要重新用更高灵敏度鲎试剂进行干扰预实验吗？

承蒙时光不弃123

预实验跟用那个鲎试剂无关，你也可以用灵敏度更高的，这里只是得到一个大致（稀释倍数）供试品浓度

未来医药界大佬

承蒙时光不弃123 发表于 2025-12-22 16:55
预实验跟用那个鲎试剂无关，你也可以用灵敏度更高的，这里只是得到一个大致（稀释倍数）供试品浓度

那老师，您的意思是，用0.25EU/ml的鲎试剂进行预实验得出最小不干扰稀释倍数为20倍后，不需要用更高灵敏度鲎试剂进行预实验，然后在正式干扰实验时，直接用更高灵敏度鲎试剂（如0.125EU/ml）对20倍供试液进行测试吗

承蒙时光不弃123

未来医药界大佬 发表于 2025-12-22 17:21
那老师，您的意思是，用0.25EU/ml的鲎试剂进行预实验得出最小不干扰稀释倍数为20倍后，不需要用更高灵敏 ...

得出稀释倍数后，计算出对应浓度下鲎试剂，再进行干扰试验；
预实验本身选用鲎试剂不等于干扰试验下的鲎试剂；
预实验意义本身是通过一个规格的鲎试剂大致试验出一个不干扰的稀释倍数，目的是得出大致稀释倍数；
干扰实验是在次稀释倍数下，选用相应鲎试剂，看该浓度的供试品和对应鲎试剂有无干扰作用。

不见猫骨头

表2是干扰试验的结果，干扰试验是用0.03的鲎试剂，在20倍及以上没有稀释的时候没有干扰，你可以得到一个大致的区间；现在让你用0.25的鲎试剂做预实验；简单一些就是C1λ1=C2λ2；你可以算出用0.25的鲎试剂时稀释倍数是多少，应该是2.5，然后你可以试试在2倍和4倍的时候有没有干扰，然后选择最合适的去验证

34f54f29

你的试验逻辑不对吧
是先确认用鲎试剂的灵敏度，如0.25EU/mL，根据限值标准计算出MVD=10，用稀释倍数≤10倍进行预干扰试验，得出最小不干扰稀释倍数
所以最小不干扰稀释倍数是在MVD内进行的，不可能大于MVD，超过MVD的试验没有意义
MVD与鲎试剂灵敏度相关，如果想要MVD大，就用灵敏度更高的鲎试剂

u1597025199

首先搞清楚你的最大稀释倍数的计算公式是什么？最大稀释倍数和什么有关

火舞精灵

预实验仅仅是在给定的一个灵敏度鲎试剂情况下，确定使用该灵敏度鲎试剂不产生干扰的最大浓度，不要考虑预实验的稀释倍数，然后采用你选定的这个灵敏度的鲎试剂和预实验确定的不干扰浓度，进行正式的干扰试验，预实验稀释20倍和正式干扰试验稀释10倍的浓度是一样的。

补充内容 (2025-12-23 18:14):
后一句错了，预实验稀释20倍和正式干扰试验稀释10倍的浓度是不一样的，正式干扰试验也是稀释20倍，虽然计算的最大稀释倍数为10倍，但10倍是有干扰的

羽遥

规范没错，这里的关键是预实验要做的最高稀释倍数（MVD）是基于制剂本身能承受的稀释极限来算的，它可能远大于鲎试剂灵敏度（如0.25EU/mL）直接换算出的10倍，只要验证在极限稀释下不干扰，就允许使用该稀释倍数；因此你无需重做实验