OD值和菌重的问题

dasheng1980

我觉得OD值和菌重有直接的关系，但并不是OD值相同时的菌重就一致，或菌重相同时的OD值就相同，并且我认为他们不是绝对的线性关系，不知大家是否同意我的看法。
请各位老师给以讨论，谢谢。

dasheng1980

有时OD不高，可菌体量不低，有时OD值挺高，可菌体量不高，这是为何？

仲夏秋夜云

OD是蛋白表达量，和细胞数量或者说菌体数量没关系。
比如说，一百个人，每个人有十块钱，和一个人有一亿比较，还是一亿的那个比较多，OD比较高，但是细胞数量低。

godme

学习了。。。

仲夏秋夜云

dasheng1980 发表于 2013-4-1 10:48
有时OD不高，可菌体量不低，有时OD值挺高，可菌体量不高，这是为何？

菌体状态不好，表达量不高，OD值不高。

dasheng1980

谢谢版主！

仲夏秋夜云

godme 发表于 2013-4-1 11:00
学习了。。。

你水了。在我版块里水，要打屁股的

cph2345

实验室确定细菌生长密度和生长期，多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验，需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液，之后定量培养后的含菌培养液。2、OD值的名词解释与测量方法的实现 　2.1 OD值名词定义：OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，是检测方法里的专有名词，检测单位用OD值表示，1OD=log10（1/trans），其中trans为检测物的透光率T值。光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。从上面的定义可以看出，OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。通过吸光值的定义可以知道，吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度，相应地与样品的透过率T值成反比，在数值上来说，它们之间是对数关系。
2.2 测量方法的实现：目前知道的测量原理就是用分光光度计来实现，包括可见和紫外分光光度计都可以，因为波长是在600nm，目前市面上所有的分光光度计都可以满足要求，但根据实验者对测量数据的精度和准确度的要求可以选择不同档次的光度计来实现。目前也有部分厂家的光度计直接支持OD600，例如天美的UV1100。如果是普通的分光光度计我们也可以实现OD600的测定，第一步在仪器的光度计模式中，先把波长走到600nm；第二步放入我们的空白样品，进行调零操作；第三部放入样品直接显示样品的T值（透过率值），之后带入OD值与T值的换算公式中可以得到OD600。个人感觉以后光度计可以直接增加测定OD值的功能，简单的办法就是在测量模式中直接加入OD选项，只需要简单的编程就可以。

仲夏秋夜云

cph2345 发表于 2013-4-2 09:52
实验室确定细菌生长密度和生长期，多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验，需要采用分 ...

本版块需要你这样的人才……认认真真找答案回答问题的人才

cph2345

dasheng1980 发表于 2013-4-1 10:48
有时OD不高，可菌体量不低，有时OD值挺高，可菌体量不高，这是为何？

你的这种问题很有可能是空白选择不对，每批的培养基有差别，造成了OD检测结果的失真。

仲夏秋夜云

cph2345 发表于 2013-4-2 09:54
你的这种问题很有可能是空白选择不对，每批的培养基有差别，造成了OD检测结果的失真。

你是做QC的？

cph2345

仲夏秋夜云 发表于 2013-4-2 09:55
你是做QC的？

不是，是做验证的，我们也存在这个问题，仅代表个人意见。

仲夏秋夜云

cph2345 发表于 2013-4-2 09:57
不是，是做验证的，我们也存在这个问题，仅代表个人意见。

是验证部门组织验证工作的，还是QC方面配合验证检验的？

cph2345

仲夏秋夜云 发表于 2013-4-2 09:58
是验证部门组织验证工作的，还是QC方面配合验证检验的？

组织验证的，管理QA的。干的比较杂呀。

cph2345

仲夏秋夜云 发表于 2013-4-2 09:53
本版块需要你这样的人才……认认真真找答案回答问题的人才

说的太严重了，互相交流而已，多认识几个行内的朋友，说不定以后成为同事了呢？呵呵，扯远了。多一个朋友总是好的。

仲夏秋夜云

cph2345 发表于 2013-4-2 10:10
组织验证的，管理QA的。干的比较杂呀。

验证管理QA？

cph2345

仲夏秋夜云 发表于 2013-4-2 11:14
验证管理QA？

是验证QA和现场QA的师傅吧。可以这么定位，他们都是我教出来的。{:soso_e112:}

dasheng1980

空白对照是一样的，没什么大问题，可能是我们光度计的问题，国产的，不太稳定！

仲夏秋夜云

cph2345 发表于 2013-4-2 11:19
是验证QA和现场QA的师傅吧。可以这么定位，他们都是我教出来的。

这个组织架构真是……

cph2345

dasheng1980 发表于 2013-4-2 12:18
空白对照是一样的，没什么大问题，可能是我们光度计的问题，国产的，不太稳定！

光度计一般都需要预热一段时间后才能进行检测，一般至少30分钟。