高效液相色谱仪常见的6个故障处理

大才子

     八年的日常工作中遇到了几种故障,如故障1 经咨询岛津公司的工程师后,得以解决;故障2、故障5 是频繁碰到的问题等,特作总结如下:
       故障1　　流动相内有气泡, 关闭泵, 打开泄压阀, 打开p urge键, 清洗脱气, 气泡不断从过滤器冒出, 进入流动相, 无论打开p urge 键几次,都无法清除不断产生的气泡。
　　原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内, 过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。
　　处理过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中12～36 小时, 轻轻震荡几次, 再将过滤器用纯水清洗几次, 打开泄压阀, 打开p urge 键,清洗脱气, 如仍有气泡不断从过滤器冒出, 继续将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏, 流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1. 0～3. 0ml/ min ,纯水冲洗过滤器1 小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。
      故障2　　柱压高原因(1) 缓冲液盐分如(乙酸铵等) 沉积于柱内; (2) 样品污染沉积。
　　处理对于第一种情况先用40～50 ℃的纯水,低速正向冲洗柱子, 待柱压逐渐下降后, 相应提高流速冲洗, 柱压大幅度下降后, 用常温纯水冲洗, 之后用纯甲醇冲洗柱子30 分钟; 对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗, 接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再用换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗, 最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。
      故障3　　既无压力指示,又无液体流过[1 >。
　　原因(1) 泵密封垫圈磨损; (2) 大量气泡进入泵体。
　　处理对于第一种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时, 用一个50ml 的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。
       故障4　　压力波动大,流量不稳定.
　　原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。
　　处理工作中注意观察流动相的量, 保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气[2 >。如为单向阀和阀座之间夹有异物, 拆下单向阀, 放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗.
       故障5　　出峰不佳,峰分叉。
　　原因(1) 色谱柱被污染; (2) 柱头填料塌陷。
　　处理对于第一种情况, 先用纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗, 接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) , 再换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料) ,装入新填料, 滴一滴甲醇, 填料下陷, 再填, 用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧, 再填平, 滴甲醇, 再压紧反复几次, 直至装满填平[2 >。柱头用甲醇冲洗干净, 擦净柱外壁的填料, 拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30 分钟以上。
       故障6　　峰面积重复性不佳。
　　原因(1) 进样阀漏液; (2) 加样针不到位。
　　处理对于第一种情况更换进样阀垫圈; 对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJ EC T 状态,以保证进样量的准确。日常工作中, 液相色谱仪的保养非常重要, 如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中, 储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液, 每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积; 样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质, 完全溶解, 尽量减少对色谱柱的污染, 以延长色谱柱的使用寿命, 同时避免注射过浓的样品溶液, 以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞; 色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

咕咕

总结得不错，总结让你少走弯路。

大呆子

认真学习了

唐伯虎

多谢分享，很具有实际指导意义

莫颜雨

我们有一根C18柱压力现在非常高，处理方法和你说的差不多，但处理后柱压还是下不来。有什么好办法？

巴西木

颜雨:我们有一根C18柱压力现在非常高，处理方法和你说的差不多，但处理后柱压还是下不来。有什么好办法？

回答：1.如果柱压力高于3000psi，但压力稳定，还可以勉强使用；如果所得峰形异常，则说明柱子的寿命快结束了，如果还想接着用，建议可以试一试：将柱子反接，柱子和检测器的连接必须断开，按上述方法处理，如果压力能降下来，则按反接使用，进样观察峰形，峰形正常，则可以接着使用。
2.C18柱压力现在非常高，说明柱头积累了很多脏东西（尽管流动相每次都过滤，但由于累积作用造成）可以使用相同的填料，打开柱头，除去柱头的脏填料，补上新的填料，填实，重新安装好，使用，观察压力和峰形是否正常。

一一

大才子果然名副其实{:soso_e179:}，谢谢分享了。很实用的经验。

龙之塬

认真学习一下，谢楼主！

大才子

一一 发表于 2012-1-8 23:54
大才子果然名副其实，谢谢分享了。很实用的经验。

过奖过奖，都是江湖论坛的朋友罩着

boheli1204

总结的不错啊，果不愧是大才子啊

wuguanghui953

总结的很好

四叶花

学习了，既然买了安捷伦的液相，干嘛不买自动进样器啊，省事多了

sdtalzr

谢谢楼主分享

饮水泉

谢谢分享，很实用

dasheng1980

谢谢楼主分享！

zhanghui

楼主好分享啊

巴西木

好资料，才看到，谢谢楼主

微雨独殇

谢谢楼主分享

kangabc

学习了。。。

薄樱鬼

很好，好好学习，谢谢楼主