1. 薄层层析。样品制备:取样品粗粉20g,用70%甲醇60℃热浸4小时,滤过,回收甲醇,得深棕色浸膏,以水溶解后通过湿法装的聚酰胺柱,柱先用水洗脱杂质至水溶液无色,再用70%甲醇洗脱,甲醇洗脱液浓缩点样。吸附剂:硅胶G。展开剂:苯-甲醇(8.5:1.5)。显色剂:2%三氯化铁的50%乙醇液+2%铁氰化钾的50%乙醇等量混合。斑点显深蓝色。
葛花的薄层层析图谱
S:a 黄豆甙 b 黄豆甙元 1.甘葛花 2.野葛花 3.越南葛花
2. 高效液相层析。样品制备:取葛花生药粉末(60目)0.1g,置50ml三角瓶,加70%乙醇10ml,超声波振荡30分钟,冷却后称重,补足损失的溶剂,离心二次,取澄清液或稀释后4μl进样。柱:4.0×250mm;固定相:ZY110YQG-C18(北京分析仪器厂);流动相:(1)甲醇-水-二氯甲烷-醋酸铵(100ml:275ml:2ml:1.7×10-3M),(2)甲醇-水-醋酸铵 (175ml:175ml:1.7×10-3M);流速0.5ml/min;检测波长:250nm;灵敏度0.04ALFS;纸速:2mm/min;压力:250kg/cm。经液相色谱分离后,得各不同种葛花的色谱图,同时与标准品进行对照。
几种葛花的高效液相色谱图谱
A. S:1.黄豆甙元-4′,7-二葡萄糖甙 2. 葛根素 3. 甲氧基葛根素 4. 黄豆甙 5.
芒柄花甙 6. 黄豆甙元 B. 粉葛花 C. 野葛花 D. 越南葛花 E. 沙葛花