无菌检查相关问题？

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-8 13:04:45

欢迎您注册蒲公英

您需要登录才可以下载或查看，没有帐号？立即注册

x

做了细胞培养上清液的无菌检查，有一瓶已经确认染菌并接种到硫乙醇酸盐液体培养基，做2个平行。在培养第2天时，有一支培养基已经非常明显培养基上部已经变浑浊，但是与他平行的另一支培养基没有变化！！

我想问的是：1、按理说，都是取自同一细胞培养瓶中的上清液并等量接种到相同的培养基中，应该一支有菌生长，另一支也应有菌生长才对呀？？为什么我做的两支出现一支长，一支不长的情况？？（细胞培养瓶中的上清液已确定染菌）
         2、会不会是自己操作上的问题，导致培养基污染？？？
         3、一般无菌培养，大概多少天会有菌生长？？？
         4、我上传的图中，这个大约会是神马菌？？？

四叶花 · 发表于 2016-7-8 13:26:05

一般无菌培养，有菌一两天会有菌生长，另一瓶再观察两天看看

左司马 · 发表于 2016-7-8 14:14:41

没听说吗？无菌要培养14天……

无为 · 发表于 2016-7-8 15:17:05

培养14天后再看

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-8 17:56:12

无为发表于 2016-7-8 15:17
培养14天后再看

问题是两支一样的，一支长一支不长？？

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-8 17:56:52

左司马发表于 2016-7-8 14:14
没听说吗？无菌要培养14天……

哎呀这个我知道呀~~~~~ 我得意思是为什么一样的两支，一支长一支不长a

cnosema · 发表于 2016-7-8 20:36:30

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-8 17:56
问题是两支一样的，一支长一支不长？？

只有2个平行，而且有没有阴性对照？结果不能排除操作方面的可能性呀。

一般的无菌检测，是10个平行吧？而且细菌，真菌各自10个吧？

cnosema · 发表于 2016-7-8 20:41:34

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-8 17:56
问题是两支一样的，一支长一支不长？？

当被测试样品污染比较严重的情况下，才会所有的测试管都长。如果污染不严重时候，10个平行里只有一个管长东西也是正常的。这就是多做平行的意义所在，提高被检测出来的几率。

cnosema · 发表于 2016-7-8 20:42:58

你的细胞培养基里，有没有加抗生素？曾经问过，你没有回答哈

左司马 · 发表于 2016-7-9 06:21:33

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-8 17:56
哎呀这个我知道呀~~~~~ 我得意思是为什么一样的两支，一支长一支不长a

好吧，多观察几天再说吧！

wangwenji · 发表于 2016-7-9 09:17:51

无菌检查的培养基15版药典是不是换了

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-10 10:19:25

cnosema 发表于 2016-7-8 20:42
你的细胞培养基里，有没有加抗生素？曾经问过，你没有回答哈

没有加抗生素

cnosema · 发表于 2016-7-10 10:48:40

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-10 10:19
没有加抗生素

那这个检测管里污染微生物的形态，和你细胞培养瓶里的污染形态，类似吗？

估计不类似，印象里你提过细胞培养瓶的上清还是清的？如果细胞培养基里没有抗生素，而这2个污染的状态，有比较明显的区别，那么有很大的可能性，它们不是同一种污染。

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-10 11:57:30

cnosema 发表于 2016-7-10 10:48
那这个检测管里污染微生物的形态，和你细胞培养瓶里的污染形态，类似吗？

估计不类似，印象里你提过细胞 ...

用显微镜观察细胞培养瓶中的上清液，发现是黑色的丝状，不游动！之前推测是真菌。但是做无菌试验到现在已经5天，并未发现胰酪大豆胨液体培养基有染菌情况，反而是硫乙醇酸盐流体培养基的一支染菌，菌落是白色的。不清楚到底是操作上染得菌还是什么原因！？

cnosema · 发表于 2016-7-11 07:40:07

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-10 11:57
用显微镜观察细胞培养瓶中的上清液，发现是黑色的丝状，不游动！之前推测是真菌。但是做无菌试验到现在已 ...

根据你的描述，测试管的污染更像是由操作引起的。

污染的细胞瓶上清，你还有吧？建议再做一次无菌检查，做2个温度（细菌和真菌），每个温度10个平行，并设置阴性对照管。

四叶花 · 发表于 2016-7-13 17:03:26

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-8 17:56
哎呀这个我知道呀~~~~~ 我得意思是为什么一样的两支，一支长一支不长a

时间长了可能都长，另一支现在长没？

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-14 14:46:19

四叶花发表于 2016-7-13 17:03
时间长了可能都长，另一支现在长没？

另一支现在还没有长

阿容 · 发表于 2016-7-15 09:27:33

2支平行的硫乙是放在同一温度下培养的吗？有可能是样品没有混匀？当然如果前两个假设都不是，出现一个长一个不长的结果也是有可能的。

小飞鱼爱太阳 · 发表于 2016-7-15 12:39:06

leibihua 发表于 2016-7-15 09:27
2支平行的硫乙是放在同一温度下培养的吗？有可能是样品没有混匀？当然如果前两个假设都不是，出现一 ...

是放在同一环境下培养的，接种之后都有摇匀

cnosema · 发表于 2016-7-15 19:24:23

小飞鱼爱太阳发表于 2016-7-15 12:39
是放在同一环境下培养的，接种之后都有摇匀

问的混匀不是接种之后的，是问接种前的样品，嘿嘿

[药品研发] 无菌检查相关问题？

欢迎您注册蒲公英

点评

评分

浏览过的版块