请问蛋白含量测定法lowry法第一法为什么选择650nm波长测定蛋白质浓度

ZRJ2YY

我们对标准品和样品都用第一法处理后，对其进行光谱扫描，发现在650nm处没有最大吸收峰，反而在760处有峰。所以请问蛋白含量测定法lowry法第一法为什么选择650nm波长测定蛋白质浓度，有没有人也扫描过发现这个问题。

ZRJ2YY

为啥没有人回复呢

aox97

以酪氨酸和 BSA 标准曲线为研究对象,对蛋白
浓度的测定方法的波长及检测蛋白浓度的范围进行
研究,对酪氨酸测定而言,在０~１００μg􀅰mL－１ 范
围内,FolinA 法在５４０~６００nm 之间测定,线性相
关性较好,其中截距在５５５nm 处是最低的,回归方
程y ＝０􀆰００８５８x ＋０􀆰０００２(R２ ＝０􀆰９９９９),而
Na２CO３ 法则是在６６０~６６５nm 线性相关性较好,
以６６５nm 为 例,其 线 性 方 程 为 y＝０􀆰０１０３x＋
０􀆰０００３(R２＝０􀆰９９９７),相比于FolinA(５５５nm)具
有更高的灵敏度,特别适合于不需要２Ｇ巯基乙醇、
LＧ半胱氨酸盐酸盐和 EDTA 等激活剂存在的蛋白
酶活力测定中的蛋白浓度测定.FolinA 法更适合
于测定波长在６００nm 以下的蛋白浓度测定以及含有
激活剂的的蛋白酶活力测定中的蛋白浓度测定.在
FolinA法中,BSA 的最佳检测波长为５５５nm,而在
低浓度范围(０~０􀆰２mg􀅰mL－１),其R２ 在５４０~６３１
nm 区域均保持０􀆰９９９９以上,以６３０nm 为例,其线
性方程为y＝２􀆰４９１３x＋０􀆰０００９(R２＝０􀆰９９９９).

aox97

现在用的福林酚法，改进加入了还原剂，最大吸收在650