关于细胞培养的问题！~~

小飞鱼爱太阳

细胞培养过程中，涉及到细胞计数问题。买的细胞计数板，可一次性记两次。我想问的是：1、不知道是什么原因，在显微镜下看到的细胞有很多，但是计数时又很少，和实际差别较大。大家都是怎么取的样？？
            2、同一个悬液，同一人的计数结果又差别较大，真是个纠结呀，大家都是怎么弄的？？
            3、计数误差应该多少计数结果才可信呀！~
还请同仁们，帮忙解答下啊~~

molur@126.com

你计数时看的倍数不一样啊。你显微镜下看的倍数低，就会看到很多细胞。如果放大倍数，看的视野小了，那自然细胞很少。问题是你用什么来计数？肉眼计数还是机器计数？肉眼技术差别也不会很大呀

cnosema

molur@126.com 发表于 2016-10-19 09:37
你计数时看的倍数不一样啊。你显微镜下看的倍数低，就会看到很多细胞。如果放大倍数，看的视野小了，那自然 ...

看描述，应该是使用类似于血球计数器的，人工计数吧

小飞鱼爱太阳

molur@126.com 发表于 2016-10-19 09:37
你计数时看的倍数不一样啊。你显微镜下看的倍数低，就会看到很多细胞。如果放大倍数，看的视野小了，那自然 ...

就是普通的计数板，用的都是同一倍数的显微镜。点4个小方格中的细胞数。就是误差很大！很揪心~

木子寒泪

你该换设备了，细胞计数仪、生化分析仪买起！

cnosema

小飞鱼爱太阳 发表于 2016-10-19 14:20
就是普通的计数板，用的都是同一倍数的显微镜。点4个小方格中的细胞数。就是误差很大！很揪心~

每次数出来的结果相差大，就需要多练习操作。至少同一个人，同一个样品，每次数出来不应该相差很多。

另，细胞悬液是比较均匀的吧？

小飞鱼爱太阳

cnosema 发表于 2016-10-19 20:17
每次数出来的结果相差大，就需要多练习操作。至少同一个人，同一个样品，每次数出来不应该相差很多。

另 ...

细胞悬液好像也不均匀，传代完后，在显微镜观察的时候总有部位密有部位稀。可是之前已经吹打了5、6下了啊。吹打太多下，不是对细胞也有损伤呀？？

小飞鱼爱太阳

木子寒泪 发表于 2016-10-19 16:41
你该换设备了，细胞计数仪、生化分析仪买起！

公司不给买

cnosema

小飞鱼爱太阳 发表于 2016-10-26 17:19
细胞悬液好像也不均匀，传代完后，在显微镜观察的时候总有部位密有部位稀。可是之前已经吹打了5、6下了啊 ...

5-6还好，不算多哈。

如果细胞悬液不均匀，怎么可能得到一致的结果呢？所以，同一个样品，每次数出来的结果上上下下的，估计是你常遇到的？

要么，想办法把细胞悬液做均匀了。要么，取很多次样，数很多次，把所有结果平均。你觉得哪个更可靠？

thwyj

细胞计数仪、生化分析仪买起！

小侠女

先大概估计一下培养皿中细胞的数量，然后计算下稀释倍数，使四个方格中是细胞数目分别在60或者70个左右，一般还是比较准确的。