微生物菌落计数

love诗意生活

大家好，有个问题想请教一下大家！最近在做非无菌制剂微生物限度检查法计数方法验证时，菌液组计数时有以下疑惑。
（1）图1是金葡的培养情况，按其菌落特征计数有6个。但另外的白色小点点和白色圈圈是什么呢？算不算到计数里面呢？
（2）图2是白念，那些小的白色点点是没有培养好吗？如果小点点算到计数里面，这个按2015版药典不得大于100，是不是得再稀释？
（3）图3是枯草，除了能看到的菌落，还有一些水痕状的圈，这是什么原因造成的呢？要算到计数里面吗？
（4）图4是铜绿，菌落特征感觉和金葡很像？
（5）图5是黒曲霉，这个计数有7个，按要求100个要怎么计数啊？

dayuebuguai

交叉污染了吧，而且黑曲霉都这么大了才数。感觉这组数据都不可靠了。

★风★

感觉是不是有污染啊？空白和阴性对照做的怎么样？还有就是药典好像是规定稀释到50-100的菌液吧。铜绿假单胞菌怎么会成金黄色了，奇怪诶。

lengling

你用的是表面涂布法还是直接倒平皿法？看样应该是直接倒平皿法。用这种方法时，如果菌落长到培养基表面，就是典型的菌落形态，像你照片中那些金黄色的金葡；如果有些菌长在培养基中间，就会“变形”，就像你照片中那些白点点或水圈。你可以仔细看看是不是这样地规律。
另外，黑曲霉计数最好每天观察，因为长时间长了会很大，影响计数结果。

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lengling 发表于 2016-12-21 09:16
你用的是表面涂布法还是直接倒平皿法？看样应该是直接倒平皿法。用这种方法时，如果菌落长到培养基表面，就 ...

用的倾注法，那这种长在里面的要不要计数呢？

love诗意生活

love诗意生活 发表于 2016-12-21 09:50
用的倾注法，那这种长在里面的要不要计数呢？

黑曲霉每天计数的话，每天都有记录，最终是按菌落数最多的计算吗？

阿容

同意4楼的观点。都得计数的

zjweike

图1、图4肯定污染，菌液组只有你的试验菌，出现两种菌肯定污染；图2不像是白念；图5黑曲霉这个状态计数有点长过了，每天都要计数。数值少了，按照要求小于100cfu，最好在10-99cfu之间。

joshua

倾注法张成这样正常，所以我不喜欢倾注法，不好通过菌落特征判断是否有污染

Sumy

（1）图1是金葡的培养情况，按其菌落特征计数有6个。但另外的白色小点点和白色圈圈是什么呢？算不算到计数里面呢？
典型的菌落形态指的是生长在培养基表面的菌落，采用平皿法倾注培养基，进行菌落计数时，不可避免会有菌生长在培养基里面，兼性厌氧菌在培养基里面生长的不比培养基表面好，所以看起来有些变形，培养基表面和里面生长的菌都要计数。
（2）图2是白念，那些小的白色点点是没有培养好吗？如果小点点算到计数里面，这个按2015版药典不得大于100，是不是得再稀释？
霉菌和酵母菌培养时间为5到7天，看看你的培养时间够了没，白色念珠菌生长比较缓慢，加上你这个图的菌过于集中，可能限制生长了，倾注培养基后要充分摇散。看到的单菌落都要计数的，计数数量大于100的话说明你需要调整稀释倍数。
（3）图3是枯草，除了能看到的菌落，还有一些水痕状的圈，这是什么原因造成的呢？要算到计数里面吗？
枯草芽孢杆菌菌落形态一般不规则生长，而且很容易随着水蔓延。生长在培养基里面的菌因为缺氧和空间原因，会比表面的菌长得慢长得小，肉眼看到的独立菌落都要计数。
（4）图4菌落特征看，很明显不是铜绿假单胞菌。
（5）图5是黒曲霉，这个计数有7个，按要求100个要怎么计数啊？
你这是菌液组，稀释级别没选好，需要调整。你这个级别得到的是7cfu的话，可以取上一个级别来做，就是70cfu了。

Sumy

joshua 发表于 2017-1-1 20:57
倾注法张成这样正常，所以我不喜欢倾注法，不好通过菌落特征判断是否有污染

虽然难以避免菌生长在培养基里面，但对没有抑菌性的大多数样品来说，这个方法操作起来是最简单的。

逝水无痕兔兔

菌落形态差异 长在培养基表面、中部、基底层形态都会不同