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层析柱再生时,缓冲部位总是产生小气泡

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发表于 2017-7-24 15:37:26 | 显示全部楼层 |阅读模式

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各位高手,我现在用填料Q  sepharose FF 分离蛋白,现在碰到很头痛的问题是,每次装柱的时候没有气泡产生,样品上样、平衡、洗脱都没有气泡,但是每次用NaOH 再生的时候,柱子缓冲部位都会产生很多小气泡,柱子重装了几次还是没有好转,不知道怎么回事望各位大神指点迷津。谢谢!


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药士
发表于 2017-7-24 16:49:53 | 显示全部楼层
用NaOH再生时,液体系统温度升高,自然很容易产生气泡。
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药徒
发表于 2017-7-24 17:20:02 | 显示全部楼层
氢氧化钠溶液估计是现配的吧,提前一天配制试试。
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 楼主| 发表于 2017-7-26 08:26:06 | 显示全部楼层
syhorchid 发表于 2017-7-24 16:49
用NaOH再生时,液体系统温度升高,自然很容易产生气泡。

以前再生的时候都没出现这种问题,最近才开始的。NaOH都是提前配好,放在冰箱里的
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 楼主| 发表于 2017-7-26 08:27:00 | 显示全部楼层
凯恩血蹄 发表于 2017-7-24 17:20
氢氧化钠溶液估计是现配的吧,提前一天配制试试。

NaOH都是提前配好的,然后放在冰箱里,用的时候拿出来。
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发表于 2017-7-26 15:11:35 | 显示全部楼层
估计是你层析柱柱头及管道里面的气泡没有排尽,用的时间长了。气泡就到填料上面了!
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药徒
发表于 2017-7-27 15:32:04 | 显示全部楼层
可以反向清洗看看。
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药徒
发表于 2019-1-28 10:42:13 | 显示全部楼层
氢氧化钠溶液上柱前是否脱气,切换氢氧化钠时管道进气就会有气泡
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药生
发表于 2020-5-20 11:31:38 | 显示全部楼层
无图无真相
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药徒
发表于 2020-5-25 09:07:51 | 显示全部楼层
建议排查一下:
1、 溶液中的气体含量
2、 溶液管道系统(是否有负压)
3、 柱头或管道或连接件残留空气
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