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[检验及监测] 铜绿假单胞菌

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药徒
发表于 2018-9-19 10:20:08 | 显示全部楼层 |阅读模式

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请教下各位,做方法适用性试验时,铜绿假单胞菌经常出现菌液组数量偏低,导致回收大于2,一般出现在有中和剂的情况,比如青霉素酶,0.3%卵磷脂及3%吐温80 ,这些都是实验室常用的中和剂,之前没有出现过该情况,今年经常出现,一般来讲,试验组或中和剂对照组基本长30-50cfu,菌液组只能长10cfu左右,大部分情况皿周会长一圈,不同人员做也会出现相同情况。
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大师
发表于 2018-9-19 11:24:47 | 显示全部楼层
试验组或中和剂对照组,与菌液组,菌落生长的形态是否一样?这样才好判断。
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药徒
 楼主| 发表于 2018-9-19 13:06:49 | 显示全部楼层
九三 发表于 2018-9-19 11:24
试验组或中和剂对照组,与菌液组,菌落生长的形态是否一样?这样才好判断。

形态一样,就是菌液组大部分,都会皿周长一圈

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会不会注皿时培养基温度高了,冷凝水多了导致长一圈?  详情 回复 发表于 2018-9-19 13:17
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药徒
发表于 2018-9-19 13:17:24 | 显示全部楼层
yaya19900816 发表于 2018-9-19 13:06
形态一样,就是菌液组大部分,都会皿周长一圈

会不会注皿时培养基温度高了,冷凝水多了导致长一圈?
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药徒
 楼主| 发表于 2018-9-19 13:47:16 | 显示全部楼层
juanx 发表于 2018-9-19 13:17
会不会注皿时培养基温度高了,冷凝水多了导致长一圈?

考虑过这个问题,培养基是现配现用,先放置室温不烫手,然后50℃左右水浴保温(45℃会凝固),注皿前会提前5~10分钟取出,冷却一会,手摸的时候都不烫手,三组是一起浇,一起混匀

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你这培养基质量不好呀,保温是放置在45摄氏度保温的。你不能给审计官说是手摸不烫手就达到45℃了。要求是注皿不超过45℃  详情 回复 发表于 2018-9-20 12:35
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药徒
 楼主| 发表于 2018-9-19 13:58:38 | 显示全部楼层
这是3组的菌落形态,,麻烦各位老师帮忙分析一下

菌液组

菌液组

中和剂组

中和剂组

试验组

试验组
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发表于 2018-9-19 14:15:23 | 显示全部楼层
可以 考虑 菌种活性,买一些 定量菌株试一下(我不是推销的)
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药徒
发表于 2018-9-20 12:35:29 | 显示全部楼层
yaya19900816 发表于 2018-9-19 13:47
考虑过这个问题,培养基是现配现用,先放置室温不烫手,然后50℃左右水浴保温(45℃会凝固),注皿前会提 ...

你这培养基质量不好呀,保温是放置在45摄氏度保温的。你不能给审计官说是手摸不烫手就达到45℃了。要求是注皿不超过45℃
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药徒
 楼主| 发表于 2018-9-21 10:56:55 | 显示全部楼层
juanx 发表于 2018-9-20 12:35
你这培养基质量不好呀,保温是放置在45摄氏度保温的。你不能给审计官说是手摸不烫手就达到45℃了。要求是 ...

琼脂的凝固点是40~45℃左右,低于这个温度培养基会凝固,45℃琼脂既不凝固,也不会损害微生物,但是我们实验发现45℃保存超过3个小时,培养基里会有琼脂颗粒,所以采用50℃保存,使用时,会提前5~10分钟取出,我看到很多说,审计老师提出手温不能说明问题,我觉得实验室是没有采用适当的保温方式,仅凭不烫手就觉得培养基可用

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3个小时足够了!合理安排实验时间  详情 回复 发表于 2018-9-21 15:50
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药徒
发表于 2018-9-21 15:50:45 | 显示全部楼层
yaya19900816 发表于 2018-9-21 10:56
琼脂的凝固点是40~45℃左右,低于这个温度培养基会凝固,45℃琼脂既不凝固,也不会损害微生物,但是我们 ...

3个小时足够了!合理安排实验时间
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药徒
发表于 2018-9-27 09:00:44 | 显示全部楼层
看平板铜绿都没有长。。。。。。。。。。。菌株是否有问题
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药徒
 楼主| 发表于 2018-9-27 15:28:53 | 显示全部楼层
Saureus 发表于 2018-9-27 09:00
看平板铜绿都没有长。。。。。。。。。。。菌株是否有问题

最近申购了定量菌株准备对比一下,如果跟菌株有关的话,试验组为什么长得很好呢
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药徒
发表于 2018-12-21 12:54:46 | 显示全部楼层
对照组没问题,实验组有问题,那就要考虑试验样品是否有抑菌性
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药圣
发表于 2022-7-23 10:06:12 | 显示全部楼层
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发表于 2022-9-8 17:03:27 | 显示全部楼层
有没有考虑到菌株的保藏问题,例如保存的温度太低了
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