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【小疑问解答2】什么叫细胞复苏?

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药生
发表于 2012-9-8 11:48:27 | 显示全部楼层 |阅读模式

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恩……知道了细胞冻存之后,有新人问我,什么叫复苏……好吧,我也来解释一下。
对于很多非专业的人(包括我)来说,刚刚进入这个行业,进入实验室工作的时候,也很迷惑,总觉得这种词汇和美国电影差不多……

细胞复苏,基于细胞冻存的原理,细胞在冻存的时候,加入了冻存液。冻存液就是普通的培养基+10DMSO。其实主要是DMSO起到了置换水分子的作用。DMSO对细胞有毒性,所以冻存的时候,要尽快放入冻存盒,放进冰箱,加入DMSO的细胞不宜在室温中久置,一般不超过5分钟。
所以呢,细胞复苏的主要步骤就是将DMSO去除。
细胞冻存管先放到37℃水浴,直到冻成一块的细胞悬液溶化。
然后准备9倍的培养基,将细胞悬液转移到培养基之中,混匀,离心,去掉上清。当然了,多准备一些培养基也是可以的,目的就是为了稀释细胞冻存液,去掉所有的液体,尽可能地洗掉DMSO。
之后再加入一份的普通培养基,培养一天。这一天时间,细胞内的残余DMSO会被逐步置换出来,是细胞的缓和时间。
一天之后,再次离心,去掉上清,加入新的培养基,继续培养。

以上就是细胞复苏……

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药徒
发表于 2012-9-8 11:50:10 | 显示全部楼层
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大师
发表于 2012-9-8 11:52:26 | 显示全部楼层
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发表于 2012-9-8 14:17:03 | 显示全部楼层
学习了,开始看题目,以为和菌种复苏程序一样,原来差别很大哈。
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药徒
发表于 2012-9-8 14:59:49 | 显示全部楼层
{:soso_e113:}没看到象美国电影中的复苏。。。。
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药生
发表于 2012-9-8 15:22:58 | 显示全部楼层
感谢扫盲,谢谢
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发表于 2012-9-29 08:08:37 | 显示全部楼层
{:soso_e163:}{:soso_e179:}谢谢
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发表于 2012-10-30 10:16:19 | 显示全部楼层
谢谢楼主,学习了
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药徒
发表于 2012-11-7 21:05:08 | 显示全部楼层
细胞复苏:一般讲究慢冻快融,慢冻指冻存要分阶段进行不能一步到位,例-70冻存,则先降至-20再-50再-70,中间还有时间限制,不一一列出;快融指细胞复苏时要在水浴中快速融化,一般规定5分钟内
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药徒
发表于 2013-3-20 15:44:49 | 显示全部楼层
学习一下,谢谢!
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发表于 2013-3-22 16:50:28 | 显示全部楼层
谢谢讲解的很详细。
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发表于 2013-3-22 17:16:32 | 显示全部楼层
学习了,这么解释很简单明了。
我们实验室有细胞检定,因为平常不做实验,看着几厚页的SOP难免头晕,将知识点分解后很容易吸收。
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药徒
发表于 2021-10-11 13:49:38 | 显示全部楼层
感谢扫盲,学到了
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发表于 2021-11-25 15:59:52 | 显示全部楼层
感谢楼主扫盲!
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发表于 2021-12-6 15:31:14 | 显示全部楼层
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药徒
发表于 2021-12-7 13:14:48 | 显示全部楼层
学习了 感谢感谢
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发表于 2021-12-7 14:39:34 | 显示全部楼层
学习到了,谢谢
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药徒
发表于 2022-5-19 20:00:47 | 显示全部楼层
感谢楼主!写的非常清楚,容易理解!
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发表于 2022-6-14 10:21:03 | 显示全部楼层
感谢楼主分享,学习一下
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发表于 2022-12-9 11:01:52 | 显示全部楼层
感谢。。。。
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