生物制品的强光照试验

sylviaxqh

在Q1B里，光照试验的样品条件是尽量减少外界对样品本身的影响，包括温度之类的，但是在生物制品中，这个强光照试验的温度又是如何设置呢？是按照接近贮藏温度进行还是在室温的条件下？

骑王子的白马1

一、光源

在ICH光稳定性试验指导原则中，对光源的波长分布有具体要求，即除450~650nm的可见光区外，还应包括320nm~400nm的近紫外区。光源有两种方式选择，第一种是光源分布波长特性相当于ISO室外日光标准D65与室内间接日光标准ID65的光源，如日光荧光灯、氨灯、卤灯等，这种光源的波长分布特性见图1、图2。

ICH药物光稳定性试验指导原则的设定依据及与我国指导原则的比较

第二种是荧光灯与紫外灯组合的光源，这种光源的波长分布特性见图3。ICH还规定，如光源可产生波长比320nm还短的辐射，则应设法滤除。我国的指导原则中规定以荧光灯作为光源。

ICH药物光稳定性试验指导原则的设定依据及与我国指导原则的比较

药物由于各自结构的特异性，使药物分解的光的波长也各不相同，药物分解的程度依赖于光源的波长分布特性。图4和图5分别为在荧光灯、紫外灯及氨灯三种光源照射下盐酸奎宁溶液与硝苯地平乙醇溶液的分解速率（ICH专家组共同研究的课题之一）。

ICH药物光稳定性试验指导原则的设定依据及与我国指导原则的比较

在盐酸奎宁溶液的试验中，荧光灯及氙灯的最大照度分别达到30万lux.h，紫外灯最大辐射能达到30w.h/m2，在400nm测定奎宁的分解量；如图4所示，盐酸奎宁无论用哪种光源照射，它的分解量均依赖于310~400nm的辐射能量，紫外光使盐酸奎宁分解。在同等照度下，奎宁在氙灯下的分解速率要显著大于荧光灯。在硝苯地平乙醉溶液的试验中，荧光灯及氙灯的最大照度分别达到2万lux.h，紫外灯最大辐射能达到10w.h/m2，用高效液相色谱法测定硝苯地平的分解量。图5显示硝苯地平的分解量不单依赖于310~400nm的辐射能，紫外光和可见光均能使硝苯地平产生分解，不同光源间硝苯地平的分解行为差异较大。荧光灯虽缺乏紫外辐射能，但硝苯地平对可见光敏感，所以在荧光灯照射下硝苯地平分解最快。笔者曾测定了尼莫地平及制剂在不同光源照射下的分解速率，实验结果表明，同一药品采用波长分布不同的光源进行光照试验，所得光稳定性的评价结果不同。

作为评价药品质量的一个环节，光稳定性试验中应该使用什么光源，是关系到试验结果评价准确与否的重要问题。光源在ICH指导原则的建立的过程中，是讨论最为激烈的问题。日本历来认为药品在生产、流通及使用过程中主要曝露在室内光，所以光稳定性试验应以室内光为中心进行评价，以荧光灯作为光源，这与我国相同。但荧光灯由于缺乏400nm波长以下的紫外光线，在此波段辐射能很弱，因此，对某些光敏感药物，如果单使用荧光灯进行光照试验，就难以观察到紫外光对其产生的影响，造成光试验结果的不全面。为此，ICH规定在使用荧光灯进行光照试验时，应该添加萦外灯。与日本的看法相左，欧盟则认为在医院、药房等场所，药品有可能被曝露于窗下的阳光中，所以光稳定性试验应以考察阳光对药品的影响为中心进行，以模拟阳光性能的低灯作为光源。在制定光德定性试验的光源时，三方最初希望达成统一的光源，但讨论再三，最终还是规定了两种光源可供选择。在选择2中，添加紫外灯以弥补荧光灯不能评价的近紫外领域的光的影响，这样得到的考察结果与选择1得到的考察结果有可能是不相同的。造成两种光源评价差异的原因在于各波段的能量分布不一致。因此，ICH规定了近紫外光与可见光各自应达到的最小曝光量。

二、曝光量

曝光量是药品光稳定性评价中另一重要因素，它关系到在光稳定性试验中药品应受到多大程度的照射。在ICH指导原则中规定光照射无论选择哪种光源，总照度必须达到120万lux.h，近紫外辐射能必须达到200w.h/m2；在我国指导原则中，规定使用荧光灯以4000士500lux的照度照射10天，总照度约为100万Iux.h，对近紫外辐射能未做规定。

ICH在设定曝光量时，美国、日本及欧共体三方各自测定室内窗旁的光量，以实测值为基础，确定了最小曝光量。从东京实测值进行推算，在夏季朝南窗边14天的曝光量能充分彼盖指导原则的规定值。

为满足最小曝光量，照射时间播根据光源来决定。在选择1中，当光源使用氙灯时，由于可见光照度不够，所以在辐射能达到200w.h/m2，时，总照度尚未达到规定值，样品还需继续照射至获得120万lux.h的照度；当以日光荧光灯为光源时，由于能量随波长的分布与日光相近，所以样品获得的辐射能和总照度能同时达到规定值。在选择2中，以荧光灯和紫外灯的组合为光源，一个样品或用两种灯同时照射，或是两种灯先后照射，但都要保证辐射能和总照度达到规定值。

三、曝光的侧定

在光稳定性试验中，为满足最小曝光量的要求，需对光量进行测定.目前主要有两种方法，第一种是使用已校正过的照度计或辐射计分别测定照度及紫外辐射能；另一种方法是化学光量测定法。在ICH指导原则中，列举了奎宁化学光量测定法测定紫外辐射能，这是利用光照射后盐酸奎宁溶液在400nm吸收度的变化来测定紫外辐射能。与照度计不同，目前辐射计的规格尚不统一，造成测定值之间存在差异。由于盐酸奎宁在400nm吸收度的变化与紫外辐射能呈线性关系，而且不受温度影响，所以ICH指导原则中收载了这个方法，用以测定样品受到的辐射能。我国指导原则中对曝光量的测定未做明确规定。

四、合理的试验体系

ICH指导原则中特别强调了光稳定性试验必须系统、合理地进行。对于原料药，要在除去包装的条件下进行试验，了解药物对光的敏感特性，并检验分析方法的适用性，提供原料药在使用、包装及标签等方面的必要情报。制剂的试验在原料药试验结束后进行，首先是除去包装，进行直接曝光试验，其次在内包装状态下进行试验，最后在上市包装状态下试验。在各试验阶段中，如果较苛刻条件产生的变化在限度范围内，则试验即可结束。比如，在直接曝光的状态下，药品没有发生变化，可判定药品对光稳定，这样就可以将包装状态下的试验省略了；如果在这一步观察到的变化超出了限度，则要进行内包装、上市包装的实验，以评价包装的效果。对于用铝箔等不透光材料作为内包装的制剂，可将包装形态的实验省略。光稳定性试验应在充分把握制剂及包装特性的基础上进行合理实验，避免浪费。我国指导原则中规定将原料药、制剂开口量于光橱中，在规定的照度下照射10天，于5、10天定时取样，按稳定性重点考察项目进行测定，指导原则对试验的合理性、系统性未做明确规定。

五、其他

在进行光稳定性试验时，还应特别注意量样方式，使药品获得均匀照射。ICH规定原料药厚度不要超过3mm，制剂要单层放工等。实验样品通常为开发阶段1批药品。若结果可疑，需另取2批样品进行测试，以确认其稳定性。为证实药品见光分解的特性，一般需做样品避光同步试验，对照样品与照射样品同步分析。我国指导原则中规定用原料药三批、制剂一批进行试验。

六、结语

综合以上对ICH光稳定性指导原则中各主要因素的分析及比较，我国光稳定性试验存在以下问题:

1. 规定光源中缺乏近紫外光部分的光线，使光照试验中的紫外辐射能不足，导致部分对近紫外光敏感药物的错误结果。药品只有在模拟日光条件下进行光照试验，才能得到全面、准确的光稳定性实验结果。

2. 曝光量不足，样品按规定的照度照射10天后，获得的总曝光量约为100万lux.h，低于ICH规定的120万lux.h总照度。曝光量不足可能会使某些药物的光稳定性试验产生假象。

3. 缺乏标准合理的光稳定性试验仪器，目前国内光强化试验多采用澄明度仪进行，因其无法排除温度、湿度等环境因素的影响，因此当药品不稳定时，难以确定是否由光照引起的。标准合理的光稳定性试验仪器必须可以控制温度、湿度及光照度。

老鸟

骑王子的白马1 发表于 2020-7-1 15:58
一、光源

在ICH光稳定性试验指导原则中，对光源的波长分布有具体要求，即除450~650nm的可见光区外，还 ...

你的100万哪来的？
新版药典我查询了下，已经是不低于120万了啊。

greenspanee

最理想的情况下当然是在真实储藏温度下进行，但有时候可能做不到（如真实储藏温度是2-8℃，而光照稳定性实验箱实现不了2-8℃），建议设置与光照研究相同温度下的避光对照。

sylviaxqh

骑王子的白马1 发表于 2020-7-1 15:58
一、光源

在ICH光稳定性试验指导原则中，对光源的波长分布有具体要求，即除450~650nm的可见光区外，还 ...

所以对于生物制品而言，合理的强光照试验设计，是应该考虑样品本身是否受温度影响而设计呢？还是说更偏向考虑到实际生产运输应用过程呢？

老鸟

骑王子的白马1 发表于 2020-7-1 15:58
一、光源

在ICH光稳定性试验指导原则中，对光源的波长分布有具体要求，即除450~650nm的可见光区外，还 ...

近紫外的要求也有啊？

骑王子的白马1

老鸟 发表于 2020-7-12 18:04
近紫外的要求也有啊？

需要有混合光源，日光与紫外

小金库

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请参考ICH办公室出的ICHQ1中的“Q1B: 稳定性试验：新原料药和制剂的光稳定性试验”部分内容