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纯化水微生物限度检测

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发表于 2020-11-27 10:13:59 | 显示全部楼层 |阅读模式

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“取纯化水20ml,用薄膜过滤法过滤,减压抽干,取出滤膜,将滤膜放入制备好的R2A培养基平板上,在30-35度培养不少于五天,计数。

  

这是我培养两天的纯化水

这是我培养两天的纯化水

这是灭菌后的纯化水

这是灭菌后的纯化水

阴性对照:取20ml已灭菌的纯化水按供试品同法处理,作为阴性对照。”
这是之前工作的小姐姐留下来的步骤,我有好多疑问
1.三联滤杯配了高温枪,可以灭菌,但是新亚的微孔滤膜怎么灭菌
2.步骤里没说缓冲液,冲洗液的事,我在网上查了可能需要,但是具体怎么做,多少量还是不知道
3.我看有的是10ml,都不可计数,那我20ml,没冲洗,没缓冲,就更不计数了。
4.请大家帮忙看看,给我指导一下

现在实验室就我一个实习生,找不到前辈请教,谢谢各位帮帮忙。


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药徒
发表于 2020-11-27 13:36:30 | 显示全部楼层
膜可以进行湿热灭菌,药典要求是取本品1ml,经薄膜过滤,小于100cfu,冲洗量的多少,你可以做一下这个方法学确认,一般是1ML重新量100ml
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发表于 2020-11-27 14:48:48 | 显示全部楼层
20毫升长那么多。抽一毫升试试就知道了。
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发表于 2020-11-27 14:50:59 | 显示全部楼层
滤膜跟器具,取样瓶一起压力蒸汽灭菌
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 楼主| 发表于 2020-11-27 14:59:49 | 显示全部楼层
Joyce1234 发表于 2020-11-27 13:36
膜可以进行湿热灭菌,药典要求是取本品1ml,经薄膜过滤,小于100cfu,冲洗量的多少,你可以做一下这个方法 ...

你好,公司里的是三联滤杯,滤杯是敞口的,抽滤装置三个口特别长,放不进去,我问了之前做实验离职的小姐姐,结果她说她滤膜不灭菌,阴性对照不长菌,我觉得是水的取样量太多的原因。
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 楼主| 发表于 2020-11-27 15:02:08 | 显示全部楼层
aliang3565 发表于 2020-11-27 14:48
20毫升长那么多。抽一毫升试试就知道了。

一毫升不能把滤膜浸透啊,要放在无菌氯化钠溶液里么?是不是之前小姐姐的步骤有问题啊,
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药徒
发表于 2020-11-27 15:17:45 | 显示全部楼层
围观学习!!
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药生
发表于 2020-11-27 16:21:38 | 显示全部楼层
滤膜用缓冲液浸湿,湿热灭菌。
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发表于 2020-11-29 10:59:07 | 显示全部楼层
1ml,用200ml缓冲液冲洗
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发表于 2020-11-30 10:49:35 | 显示全部楼层
最后怎么做的
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 楼主| 发表于 2020-11-30 11:00:08 | 显示全部楼层
18777309701 发表于 2020-11-27 14:50
滤膜跟器具,取样瓶一起压力蒸汽灭菌

滤膜需要用无菌氯化钠浸泡过后湿热灭菌么,用什么器具装滤膜,可不可以放到灭菌袋里,
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发表于 2020-11-30 14:23:26 | 显示全部楼层
李会玲 发表于 2020-11-30 11:00
滤膜需要用无菌氯化钠浸泡过后湿热灭菌么,用什么器具装滤膜,可不可以放到灭菌袋里,

我就简单装烧杯,包上锡箔纸
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药徒
发表于 2020-11-30 14:45:49 | 显示全部楼层
根据药典第二部来就可以啦,里面写很清楚
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发表于 2021-4-6 17:35:31 | 显示全部楼层
微孔滤膜可以买一次性的啊,冲洗用的缓冲液药典有规定,一般不超过500ml.
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发表于 2022-8-22 17:06:47 | 显示全部楼层
哇,你的膜做的很干净,求赐教,我的膜老是有一圈菌。可以方便聊聊吗
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