液相api检测杂质OOS，帮忙分析下

云帆四海

液相api含量及杂质检测，OOS批次杂质1.6%，限度不超过0.8%序列如下：

空白无异常
对照sigma试剂，有该杂质0.05%
01批样品该杂质0.5%
02批样品该杂质0.05%
03批OOS批次该杂质1.6%

OOS批次原进样小瓶复检该杂质0.5%，原容量瓶复检该杂质0.05%，原样重新配置复检该杂质也是0.05%。
实验未见明显异常，
实验：称取样品20mg用流动相溶解于50ml容量瓶，即可。

问题1：所用试剂及常规检测样品中均含有该杂质，一般较小。
问题2：整个实验中就没出现这么高杂质的溶液。
问题3:  原进样小瓶、原容量瓶及原样检测多次均在合格范围内，无杂质1.6%这么高的情况。
该杂质这么高怎么产生的？

飞凌大圣

请回答一下我的疑问：
1、1.6%级以上的杂质是第一次出现，还是以前也遇到过类似情况？
2、容量瓶的样品比进样小瓶的差了10倍，这两个难道不是同一个溶液吗，如果是同一个溶液，差10倍就很不正常了，查下原因？
3、假设你01批、02批、03批样品基本一致，请问三批之间的差异也是10倍，什么原因？
4、sigma的试剂作为对照品，有该杂质0.5%，这个是对照品计算，还是面积归一化法计算的？
5、再把原来容量瓶和进样小瓶的样品全部重新进一遍，看下个样品之间的差异再来讨论？
6、该杂志是否会出现降解，稳定性怎么样啊，对照品是现配的吗？
7、你是研发品种，还是常年大生产品种？

看了你的情况罗列，我也提了好几个问题，我个人的初步判断是：你的有关物质检测方法存在缺陷。
请楼主提供更有力的分析证据，谢谢！

本草之光辉

学习了，没想到这么多
向大神膜拜

琥珀主

赞同沙发观点。
同时，我比较关注的是两个点，第一：原进样小瓶复测从1.6%变成了0.5%；第二，原进样小瓶0.5%，但原容量瓶只有0.05%。这两个是极不正常的，说明你的系统非常不稳定。同一溶液都无法保持一致的结果。
我个人建议从两方面考察排查，一个是你们的进样瓶是否全新？还是会洗洗再用？另一方面，建议你们用热水，异丙醇和甲醇依次全面冲洗你的液相系统（不包括色谱柱），然后再进行测试。

云帆四海

飞凌大圣 发表于 2020-12-1 23:12
请回答一下我的疑问：
1、1.6%级以上的杂质是第一次出现，还是以前也遇到过类似情况？
2、容量瓶的样品比 ...

1、1.6%这么高是第一次出现，之前未有这么高的情况，普遍在0.5%一下。
2、是同一个溶液，未发现明显异常。
3、看了01和02批次，结果分别为0.31%和0.32%，再往前推三批次结果为0.37%  0.47%  0.54%
4、面积归一法查看
5、原进样小瓶和原容量瓶已进样多次，均为0.5%和0.05%,不同仪器进样结果一样，原样检测结果为0.05%。
6、对照品是现配的，如果杂质降解，该样品原样复检也没出现这个高的杂质？
7、不是研发品种，api中间体

云帆四海

琥珀主 发表于 2020-12-2 10:19
赞同沙发观点。
同时，我比较关注的是两个点，第一：原进样小瓶复测从1.6%变成了0.5%；第二，原进样小瓶0. ...

1、进样小瓶一次性使用
2、更换不同仪器，戴安u3000和安捷伦1260二代结果一致

laifukun321

1.进样过程调查，你的系统适应性用的是对照还是试液？分别进的多少针？RSD值多少？系统适应性是否通过，对照品进的多少针RSD是否通过，供试品溶液进的多少针，RSD是否通过。这个环节如果没有问题，代表仪器和进样环节没有问题。可以用原样复测，来佐证判断结果。2.溶液配制过程调查，进样小瓶是否会残留，如果是用的一次性小瓶子几乎可以排除。容量瓶是否会残留，称量过程是否有问题，记得用实验去佐证别光理想。可以用原液复测排除进样小瓶问题，重新配制样品复测排除容量瓶和称量问题。
3.取样过程，取样器具是否被污染，是否有可能引入残留。如果1 2 3批一起取的样几乎可以排除。重新取样复测排除取样过程问题。
4.方法重新确认是否有问题，产品生产过程是否有问题。

云帆四海

laifukun321 发表于 2020-12-3 10:15
1.进样过程调查，你的系统适应性用的是对照还是试液？分别进的多少针？RSD值多少？系统适应性是否通过，对 ...

1、序列建立无RSD适应性，为：blank  blank blank  鉴别对照  样品1 样品2 样品3。仪器无故障报错，压力峰面积等 均正常。
2、原液检测、原容量瓶和原样检测出来3个结果。 均不同于首次OOS结果
3、暂不做生产原因调查，  仅实验室检测一批样品出现4个异常结果都说不通。
4、如果方法有问题，那之前检测的那些批次为啥没报过异常，如何解释，你说方法可能哪里有问题呢？

loneeagle

杂质峰形如何？是否有积分异常？如果用的DAD检测器建议看一下杂质的峰纯度是否有异常。

云帆四海

loneeagle 发表于 2020-12-3 11:05
杂质峰形如何？是否有积分异常？如果用的DAD检测器建议看一下杂质的峰纯度是否有异常。

峰形非常漂亮，很好的一个杂质峰
如果溶液要打打液质，一是先需要找个方法，较麻烦；二是定出分子量来，结构式也很难推到，到底是个啥物质是不是比较难分析？
峰的纯度有异常能说明哪些问题？

laifukun321

云帆四海 发表于 2020-12-3 10:49
1、序列建立无RSD适应性，为：blank  blank blank  鉴别对照  样品1 样品2 样品3。仪器无故障报错，压力 ...

你都没走系统适应性 而且样品不走平行样。 现在结果异样了怎么去调查？ 首先你OOS调查都应该是最后的环节一直倒推到最前面的环节。

laifukun321

云帆四海 发表于 2020-12-3 10:49
1、序列建立无RSD适应性，为：blank  blank blank  鉴别对照  样品1 样品2 样品3。仪器无故障报错，压力 ...

你调查要有思路。因为你没有走SS和平行样，这样已经算偏差了。  你现在需要用原对照品溶液来 走系统适应性 然后所有的待测原溶液走双样双针 来判断样品进样过程有问题没有？ 如果没有再回头去调查配制过程。你现在是进样过程都没有确认是不是有问题 直接跳到了配制过程。 这个调查问题的思路上有问题。
你说的重新测试出来与原来的OOS结果不一致， 那么现在可肯定问题是出现在了进样环节和样品配制过程环节。但是由于你们有进行第一步的调查所以不能判断样品配制环节出了问题还是进样过程出了问题。需要找到真正的原因就由需要回到开始进样过程调查。当然你也可以假设原因然后通过实验证实，只是这样漫无目的的找就看运气了。

云帆四海

laifukun321 发表于 2020-12-3 14:12
你调查要有思路。因为你没有走SS和平行样，这样已经算偏差了。  你现在需要用原对照品溶液来 走系统适应 ...

1、我接受的思路都是调查从头开始，谁说的调查是从后一步往前倒推，在依据实验室调查清单调查无异常后才是进行实验。
2、难道你们所有的序列都是运行SST吗？没有不运行的例如原料之类

loneeagle

云帆四海 发表于 2020-12-3 11:23
峰形非常漂亮，很好的一个杂质峰
如果溶液要打打液质，一是先需要找个方法，较麻烦；二是定出分子量来， ...

1、由于之后多次原溶液进样该杂质水平都平行且合格，排除溶液配制及进样瓶污染；
2、由于进样顺序是空白、样品1，样品2、样品3，样品1和2该杂质合格，排除仪器中残留所致OOS结果；
根据以上两点，一是怀疑峰形不好，积分有问题，比如说峰比较趴，基线的漂移就能对结果造成较大的影响；但你的回复又否定了这一点（S/N 多少？）
二是怀疑你这个OOS结果是把相邻的峰或系统峰并进去了，这个通过峰纯度可能能显示出来。

另外你OOS的这一针其他峰面积或杂质水平有没有异常？

laifukun321

云帆四海 发表于 2020-12-3 15:08
1、我接受的思路都是调查从头开始，谁说的调查是从后一步往前倒推，在依据实验室调查清单调查无异常后才 ...

生产的样品还能不运行系统适应性？还能走单针进样？  你非要说你接受的OOS是前端到后端的调查方式，那我只能说教你的人就不怎么样。OOS都是走发现的问题往前推一个步骤一个步骤的去找问题。