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[质量控制QC] 关于细菌内毒素检测中的疑惑,求解?

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药徒
发表于 2021-6-20 18:32:34 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 飞凌大圣 于 2021-6-21 07:54 编辑

各位老师好,本人刚接触细菌内毒素,很多不明白,想请问一下,下列干扰实验标品稀释影响大不大
1.目前我们的做法是90Eu标品用水稀释到1.2EU/mL(鲎试剂灵敏度为0.06),然后2λ溶液=100ul(1.2标品)+900ul供试液,λ溶液=500(2λ)ul+500ul供试液。
2、有一个样品,干扰试验原倍就成功了,但是后面几批样品,原倍都不成功、这种情况是否可以重新启动方法学,还是说每一次检验还是按照原来的原倍一直做直至成功。

点评

敬告:鉴于新手,不予处罚。下次发帖时请完善帖子标题,谢谢!  发表于 2021-6-21 07:56
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大师
发表于 2021-6-21 09:10:36 | 显示全部楼层
这种玩意的浓度本来就很不准确,只是个量级。
重做方法学吧
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发表于 2021-6-21 08:00:31 来自手机 | 显示全部楼层
建议买个10EU的标准品试试,90EU稀释到0.06差了1500倍了,过程中误差的范围很大了。
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药徒
 楼主| 发表于 2021-6-21 08:27:36 来自手机 | 显示全部楼层
Arya12345 发表于 2021-06-21 08:00
建议买个10EU的标准品试试,90EU稀释到0.06差了1500倍了,过程中误差的范围很大了。

买的中检院的,90的有货,10的话是不是鲎试剂厂家的啊?那这样的话是不是需要自己标定?
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药徒
发表于 2021-6-21 08:57:08 | 显示全部楼层
1.我不知道你的标准品是怎么稀释到2λ和λ的,有没有遵循每稀释一步不得大于10倍的规定?2.样品MVD=1?还是计算出的MVD可以稀释?3.正常的供试品阳性是(举个例子,比如MVD是100倍)那2λ:4λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);λ:2λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);1/2λ:λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);1/4λ:1/2λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);4.按你提供的,你的λ的值已经不对了。
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药生
发表于 2021-6-21 09:40:13 | 显示全部楼层
两个厂家的鲎试剂连续三批才可以
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药徒
 楼主| 发表于 2021-6-21 09:49:04 来自手机 | 显示全部楼层
天河注水 发表于 2021-06-21 08:57
1.我不知道你的标准品是怎么稀释到2λ和λ的,有没有遵循每稀释一步不得大于10倍的规定?2.样品MVD=1?还是计算出的MVD可以稀释?3.正常的供试品阳性是(举个例子,比如MVD是100倍)那2λ:4λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);λ:2λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);1/2λ:λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);1/4λ:1/2λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);4.按你提供的,你的λ的值已经不对了。

老师您好,谢谢您的回答
1.我们有遵循每一步稀释不得>10,是:90-9,9-1.2。
2,计算出的MVD可以稀释。
3.为什么要4λ→2λ去配标准品呀,我直接用2λ的供试品液去稀释成λ溶液为啥不对呢?
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药徒
发表于 2021-6-21 11:19:37 | 显示全部楼层
刘小懒、 发表于 2021-6-21 09:49
老师您好,谢谢您的回答
1.我们有遵循每一步稀释不得>10,是:90-9,9-1.2。
2,计算出的MVD可以稀释。

好的,那根据你的思路走,我们要求的干扰试验的供试品阳性是MVD下的供试品和(2λ、λ、1/2λ、1/4λ)下的溶液。1.那你的第一个,2λ的那个,鲎试剂的灵敏度是满足了这个要求(1.2EU/ml÷(0.1ml+0.9ml))=0.12EU/ml,但是供试品溶液呢?0.9ml÷(0.1ml+0.9ml)=0.9ml,它已经不满足MVD的要求了。2.你的λ那个,你算算?
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药徒
 楼主| 发表于 2021-6-21 14:49:42 来自手机 | 显示全部楼层
天河注水 发表于 2021-06-21 11:19
好的,那根据你的思路走,我们要求的干扰试验的供试品阳性是MVD下的供试品和(2λ、λ、1/2λ、1/4λ)下的溶液。1.那你的第一个,2λ的那个,鲎试剂的灵敏度是满足了这个要求(1.2EU/ml÷(0.1ml+0.9ml))=0.12EU/ml,但是供试品溶液呢?0.9ml÷(0.1ml+0.9ml)=0.9ml,它已经不满足MVD的要求了。2.你的λ那个,你算算?

您好老师,我还是不明白
1ml水复溶标品,标品用制备好的供试液去稀释到1.2,然后,2λ=100ul(1.2Eu/ml)+900ul供试液;λ=500ul(2λ溶液)+500ul供试液,L限值是Eu/ml,浓度也不会变啊,这样稀释咋就不是MVD呢
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药徒
发表于 2021-6-22 13:48:13 | 显示全部楼层
刘小懒、 发表于 2021-6-21 14:49
您好老师,我还是不明白
1ml水复溶标品,标品用制备好的供试液去稀释到1.2,然后,2λ=100ul(1.2Eu/ml)+ ...

你是用供试液稀释标准品?
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药徒
 楼主| 发表于 2021-6-22 14:51:03 来自手机 | 显示全部楼层
天河注水 发表于 2021-06-22 13:48
你是用供试液稀释标准品?

不是不是,我说错了,我是用水稀释到1.2EU/mL,然后用供试品去稀释供试品2λ溶液到λ
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药徒
发表于 2021-6-22 15:06:16 | 显示全部楼层
刘小懒、 发表于 2021-6-22 14:51
不是不是,我说错了,我是用水稀释到1.2EU/mL,然后用供试品去稀释供试品2λ溶液到λ

你电话多少,我们直接打电话说吧,感觉说不清楚,可私发!
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药徒
发表于 2021-6-22 20:31:55 来自手机 | 显示全部楼层
天河注水 发表于 2021-06-21 08:57
1.我不知道你的标准品是怎么稀释到2λ和λ的,有没有遵循每稀释一步不得大于10倍的规定?2.样品MVD=1?还是计算出的MVD可以稀释?3.正常的供试品阳性是(举个例子,比如MVD是100倍)那2λ:4λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);λ:2λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);1/2λ:λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);1/4λ:1/2λ(0.5ml)+50倍稀释液(0.5ml);4.按你提供的,你的λ的值已经不对了。

请教一下每稀释一步不得大于10,这个规定是出自哪里?
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药徒
发表于 2021-6-22 20:32:26 来自手机 | 显示全部楼层
DR0b577d9b 发表于 2021-06-22 20:31
请教一下每稀释一步不得大于10,这个规定是出自哪里?

这么规定有什么考虑吗?
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药仙
发表于 2021-6-23 07:26:01 来自手机 | 显示全部楼层
买的浓度,也是个范围值,而且这个检测属于定性检测。
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药徒
 楼主| 发表于 2021-6-23 09:01:25 来自手机 | 显示全部楼层
天河注水 发表于 2021-06-22 15:06
你电话多少,我们直接打电话说吧,感觉说不清楚,可私发!

老师您开启了聊天申请,私聊不了鸭
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药徒
发表于 2021-7-1 10:29:07 | 显示全部楼层
DR0b577d9b 发表于 2021-6-22 20:32
这么规定有什么考虑吗?

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