药典为啥规定紫外光谱全波长扫描从230nm开始？

张寅

如题，药典为啥规定紫外光谱全波长扫描从230nm开始？

我们产品为重组蛋白，紫外扫描从190nm-400nm，在230nm有个最大吸收值，如果按照规定，那最大吸收波长为280nm。

偶尔范范小糊涂

230是你溶剂最大吸收值

张寅

偶尔范范小糊涂 发表于 2021-9-24 17:03
230是你溶剂最大吸收值

在测全波长扫描的时候，会用溶剂去blank的呀，我概念里，已经blank了，那正式读数的时候，溶剂峰位置应该没有吸收吧

且罢

哪里规定了“紫外光谱全波长扫描从230nm开始”？通则0401吗？还是这个品种项下？

“紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围”

k12312

如果药典规定了，在280nm处有最大吸收峰，而你们的确在230nm处出现最大吸收，你觉得是药典问题还是产品问题？而且你是重组蛋白。你怀疑标准问题，可以看一下当时质量标准制定的数据分析。或者看看其他市场批次或其他企业的同类产品是否出现类似情况。

张寅

且罢 发表于 2021-9-24 17:54
哪里规定了“紫外光谱全波长扫描从230nm开始”？通则0401吗？还是这个品种项下？

“紫外-可见分光光度法 ...

我们参照各论中的，类似的产品（白介素类的），看到的紫外光谱，是从230开始的，230nm~360nm

D:\紫外光谱.png

张寅

k12312 发表于 2021-9-25 08:16
如果药典规定了，在280nm处有最大吸收峰，而你们的确在230nm处出现最大吸收，你觉得是药典问题还是产品问题 ...

我不是想质疑药典或者产品，我们就是参考各论中同类产品的紫外光谱检测方法。
我的想法是，肯定有我知识范围外的原因，使得药典规定了紫外光谱扫描从230nm~360nm。我就是想知道，为什么不按照通则0401（190nm~800nm），而是特别选择了230nm~360nm

328650673

我们公司类似的的样品和你的峰是一样的，可能是里面有一些杂质在230nm有最大吸收吧，不过我们的结果是报250-320中的最大值

张寅

328650673 发表于 2021-9-26 14:24
我们公司类似的的样品和你的峰是一样的，可能是里面有一些杂质在230nm有最大吸收吧，不过我们的结果是报250 ...

我们是把除了蛋白以外的成分，做成了基质，然后用基质去blank的，所以我不太确定230nm处的是什么

k12312

张寅 发表于 2021-9-26 10:57
我不是想质疑药典或者产品，我们就是参考各论中同类产品的紫外光谱检测方法。
我的想法是，肯定有我知识 ...

嗯，你这个问题，有可能需要考虑一下截止波长。

小林77

我猜测是绝大部分物质在220-230附近都有最大吸收峰，避免潜在干扰，主动去除这一段。而一般蛋白的最大吸收在280附近，核酸的最大吸收在260附近。这个是有特异性的吸收峰。

张寅

小林77 发表于 2021-10-15 10:49
我猜测是绝大部分物质在220-230附近都有最大吸收峰，避免潜在干扰，主动去除这一段。而一般蛋白的最大吸收 ...

我能接受您说的，大部分物质在220-230有吸收，我比较疑惑的是，我用基质（和成品的区别是没有蛋白，其他都一样）去blank，那220-230的吸收不是应该被blank掉了么，那我测成品样的时候，在220-230这个地方不就应该没有峰出来了。

小林77

张寅 发表于 2021-10-15 16:23
我能接受您说的，大部分物质在220-230有吸收，我比较疑惑的是，我用基质（和成品的区别是没有蛋白，其他 ...

220-230附近蛋白也是有强吸收峰的，去掉空白之后就是蛋白的吸收峰。

一袋天椒

230nm是肽键最大吸收，280nm是酪蛋白等芳香族氨基酸最大吸收峰，
1. 判定上从230---360，左侧为末端吸收，虽为最大吸收值但是不成峰，产品符合规定，无问题，
2. 药典为230nm开始，不从190nm开始是因为，280nm更通用，各种蛋白质的的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸这三种氨基酸的含量差别不大。肽键可能因为构象不同而影响。

张寅

一袋天椒 发表于 2023-9-19 16:01
230nm是肽键最大吸收，280nm是酪蛋白等芳香族氨基酸最大吸收峰，
1. 判定上从230---360，左侧为末端吸收， ...

明白了，230nm是肽键最大吸收，然后因为构象不同会造成影响，所以防止他对我们(的判断)形成干扰，所以就直接从230nm开始，然后用280nm(更稳定)来进行判断。