层析柱装柱

一盏香茗醉

看了论坛分享层析柱装柱的不是太多，在这里想向大家请教一下，装6.6mm直径的柱子(我们用的赛芬的）有啥好方法吗？实验室出去做验证用，柱效总是不合格，装的Capto SP ImpRes介质，有哪位大神有相关经验，还请分享一下。

奋斗的小青年a

不对称因子怎么样？测量柱效的峰型怎么样？一般从这方面下手；
只关注柱效的话和填料本身使用的次数，包括再生情节等也有直接关系

奋斗的小青年a

或者参考Cytiva的0.5 cm 直径的装柱手册，见Cytiva官网，或咨询售后工程师

疏大平

我没有使用这款层析柱，但是装柱过程应该差不多。我平时是将层析空柱里注入1cm高度的注射水打开管道下口端排管道的空气再关闭排水，其次将填料充分重悬后倒入层析空柱，一般情况静置4h以上或过夜静置。接着连接上柱头，开启层析仪走水彻底排空上柱头的空气，然后将上柱头缓缓下压至自然沉降的柱料界面后宁死，开启层析仪进行走水，压力控制在1.5-2.0bar,维持3个柱体积，等填料降至一定界面后将上柱头下压至界面即可（下压过程下水头要断开），基本上柱效会在1.5的样子。另外如果多次柱效还是不合格，则需要考虑是不是柱料不能用了。

猫咪特工

谢谢分享。

阿狸拖龙记

我们是使用AKTA层析系统装柱，缓冲液使用150mmol/l氯化钠，测柱效使用0.02CV 的1M/L氯化钠。首先要确保柱头气体排掉，空柱子清洁干净后把下柱头接上，程序设定反冲，使得液面高于下柱头1cm左右将填料充分混匀加入层析柱，加满后用针管从层析柱下柱头慢慢抽取层析柱的溶液，使得液面逐渐下降，注意要慢并观察层析柱的填料高度，当液面高于填料界面2cm左右时继续加剩余的填料，并重复上一个步骤。直至填料高度装到满意的高度。接上上柱头，仍然从下往上反冲（3倍工作流速，工作流速为柱体积除以5），可以防止上柱头管路中的气体进入层析柱。反冲几分钟后正冲15分钟左右，拧下下柱头，然后缓慢的将上柱头往下拧，直至柱头接触填料界面，再把上柱头向下拧2-3mm。把下柱头接到柱位阀，反冲几分钟后再正冲几分钟，如果填料不下降则进行柱效测试。

一盏香茗醉

疏大平 发表于 2022-3-8 10:56
我没有使用这款层析柱，但是装柱过程应该差不多。我平时是将层析空柱里注入1cm高度的注射水打开管道下口端 ...

你好，感谢分享，用的是新胶，工艺原因柱效要求较高，看了您的装柱方法基本一致，就是静置没有静置这么久，今天试试多静置一会。

轻舞飞扬-spring

您这是实验室层析柱，都是自己手动装填，没法以工业层析柱装填标准来对应，主要能满足分离要求，装的柱子都是合格的

小金库

好资料，拿走了

L576817603

阿狸拖龙记 发表于 2022-03-08 13:06
我们是使用AKTA层析系统装柱，缓冲液使用150mmol/l氯化钠，测柱效使用0.02CV 的1M/L氯化钠。首先要确保柱头气体排掉，空柱子清洁干净后把下柱头接上，程序设定反冲，使得液面高于下柱头1cm左右将填料充分混匀加入层析柱，加满后用针管从层析柱下柱头慢慢抽取层析柱的溶液，使得液面逐渐下降，注意要慢并观察层析柱的填料高度，当液面高于填料界面2cm左右时继续加剩余的填料，并重复上一个步骤。直至填料高度装到满意的高度。接上上柱头，仍然从下往上反冲（3倍工作流速，工作流速为柱体积除以5），可以防止上柱头管路中的气体进入层析柱。反冲几分钟后正冲15分钟左右，拧下下柱头，然后缓慢的将上柱头往下拧，直至柱头接触填料界面，再把上柱头向下拧2-3mm。把下柱头接到柱位阀，反冲几分钟后再正冲几分钟，如果填料不下降则进行柱效测试。

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