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[质量检验] 细胞产品的无菌检查(直接接种法)

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发表于 2022-9-29 11:35:40 来自手机 | 显示全部楼层 |阅读模式

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大家有用15ml装量的FTM吗?这个装量还没培养够14天,氧化层就超过1/2了。还有就是接种细胞悬液样品后,样品成絮状物悬在FTM里。不知道大家有没有这种类似的情况?
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发表于 2022-10-24 11:41:01 | 显示全部楼层
我们也有遇到过类似情况,我们鉴定过这个絮状物不是微生物
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药徒
发表于 2022-10-25 08:03:50 来自手机 | 显示全部楼层
死细胞降解产物
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发表于 2022-10-25 22:20:05 来自手机 | 显示全部楼层
马上要开展这个实验可以多多交流吗
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药徒
发表于 2022-10-26 08:02:49 | 显示全部楼层
前期处理的好,氧化层就会少很多;絮状物自己鉴别下,我们的是产品本身,不是微生物
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 楼主| 发表于 2022-10-30 12:00:02 来自手机 | 显示全部楼层
Laity、 发表于 2022-10-24 11:41
我们也有遇到过类似情况,我们鉴定过这个絮状物不是微生物

是的,肯定不是微生物,样本刚加进培养基就有
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 楼主| 发表于 2022-10-30 12:00:44 来自手机 | 显示全部楼层
15901358626 发表于 2022-10-25 22:20
马上要开展这个实验可以多多交流吗

可以的
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 楼主| 发表于 2022-10-30 12:02:34 来自手机 | 显示全部楼层
asan16888 发表于 2022-10-26 08:02
前期处理的好,氧化层就会少很多;絮状物自己鉴别下,我们的是产品本身,不是微生物

絮状物不是微生物,但是这种状态在培养期间也比较难判断是否有变化,万一长菌了,因为絮状物的存在一时半会发现不了长菌
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 楼主| 发表于 2022-10-30 12:05:21 来自手机 | 显示全部楼层
asan16888 发表于 2022-10-26 08:02
前期处理的好,氧化层就会少很多;絮状物自己鉴别下,我们的是产品本身,不是微生物

我们是将成品培养基分装到50毫升离心管,每管15毫升,分装后就全部氧化了,用之前隔着管煮沸至氧化层消失再用,可是培养期间还是很快就全部氧化了。我怀疑15毫升装量太小了,不知道增大装量是否可行

点评

跟前期处理关系很大,装量影响有限  详情 回复 发表于 2022-11-10 08:22
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药徒
发表于 2022-10-30 12:30:53 | 显示全部楼层
锥锥 发表于 2022-10-30 12:05
我们是将成品培养基分装到50毫升离心管,每管15毫升,分装后就全部氧化了,用之前隔着管煮沸至氧化层消失 ...

肯定不够啊,FTM是要厌氧,你管子中留那么多的空气,氧化层肯定很快就出来,
你如果见过薄膜过滤法的无菌滤筒,就知道培养基的装量应该要占到容器的3/4的差不多的比例了
以及容器里的絮状物,影响判断,按照药典要求是需要培养14天后,转种至同类型培养基里继续培养的。
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发表于 2022-11-3 13:12:28 | 显示全部楼层
请问这个细胞检测的取样来是怎么定的?
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 楼主| 发表于 2022-11-5 11:27:24 来自手机 | 显示全部楼层
yanking-7 发表于 2022-11-03 13:12
请问这个细胞检测的取样来是怎么定的?

我们是参考药典,但药典没有明确指出细胞悬液样品取多少,不知道别人都是怎么取的
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发表于 2022-11-8 13:47:00 | 显示全部楼层
这种情况需要转接
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药徒
发表于 2022-11-10 08:22:59 | 显示全部楼层
锥锥 发表于 2022-10-30 12:05
我们是将成品培养基分装到50毫升离心管,每管15毫升,分装后就全部氧化了,用之前隔着管煮沸至氧化层消失 ...

跟前期处理关系很大,装量影响有限
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药徒
发表于 2022-11-11 17:48:23 | 显示全部楼层
细胞样直接接种应该无法避免絮状物,可以考虑薄膜过滤法
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 楼主| 发表于 2022-11-16 10:43:21 来自手机 | 显示全部楼层
沙漠j1m 发表于 2022-11-11 17:48
细胞样直接接种应该无法避免絮状物,可以考虑薄膜过滤法

薄膜过滤法有细胞密度上限,细胞多了会堵膜
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药徒
发表于 2022-11-17 09:31:55 | 显示全部楼层
你用的容器不对,做无菌检查不能用离心管,要不就会出现你这种情况。
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药徒
发表于 2022-11-28 12:57:51 | 显示全部楼层
锥锥 发表于 2022-11-16 10:43
薄膜过滤法有细胞密度上限,细胞多了会堵膜

那用直接接种法 岂不是要接种很多管?鉴别这块容易区分吗?
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 楼主| 发表于 2022-11-29 14:15:43 来自手机 | 显示全部楼层
风停竹声静 发表于 2022-11-17 09:31
你用的容器不对,做无菌检查不能用离心管,要不就会出现你这种情况。

为什么不能用离心管?应该用什么容器?请求指点!
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 楼主| 发表于 2022-11-29 14:21:15 来自手机 | 显示全部楼层
沙漠j1m 发表于 2022-11-28 12:57
那用直接接种法 岂不是要接种很多管?鉴别这块容易区分吗?

接种很多管可以吗?管数越多肯定这种絮状物现象会越不明显,但接种管数多,样品在接种过程中被污染的风险也大了
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