你问我答 | 第 1 弹：细胞实验常见问题解答

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细胞实验老踩坑？网上回答五花八门，身边又难以找到明白人解释清楚？那就看看小陶总结的可能会遇到的几个问题吧~

1）如何选择适合的抑制剂？其中有哪些因素帮助我们选择？

①活性 —— 同一靶点的化合物很多，但是活性会有区别。IC50或EC50分别代表了化合物抑制或者激活剂的活性，IC50或EC50越小代表活性越好，一般来说实验效果也会更加明显；

②特异性 —— 不同化合物对靶点的特异性不同，可以挑选对目标靶点特异性较高的抑制剂，生物反应中，特异性高的化合物产生的副反应较小，对实验的干扰更少；

③普遍性 —— 化合物使用的普遍性一般体现在文献报道中，文献报道越多代表此化合物的研究、使用越成熟，参考文献中此化合物的使用更有利于实验的开展。

④如果实验对化合物有其他要求的，可以联系陶术技术人员帮助挑选。

2）如何制备母液，如果不澄清应该怎么处理？

①抑制剂产品一般都有明确的溶解度信息，母液配置浓度不要超过溶解度，否则可能会出现无法完全溶解的情况；

②如果采用的溶剂为DMSO或者无水乙醇，要求母液浓度一般为工作液浓度的1000倍以上，以避免溶剂对细胞的毒性；如果采用的溶剂为水，溶解完成后最好过滤除菌一下，以避免污染的情况出现；

③按照上述要求配制一般不会出现溶液不澄清的情况，除非化合物本身的溶解过程比较慢，这时候可以借助加热或者超声来加快化合物的溶解。

3）如何快速解决计算问题？

针对细胞实验的计算问题，可以借助Targetmol或陶术网站上的一些工具，只需填入需要计算的数据便可以快速获得相应的结果。

• 摩尔浓度计算器，可用于计算物质的量浓度
  
  

[color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]

• 稀释计算器，可用于计算稀释所需的溶剂体积
  
  

• 配液计算器，快速计算配液浓度
  
  
  

[color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]

• 分子量计算器，根据分子式快速得到分子量
  
  

[color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]PS：给大家总结一下，小工具的获取途径：

• TargetMol或陶术网站任意抑制剂的界面；
• 手机微信搜索“陶术生物”小程序  
• TargetMol网站首页的左上角“工具”或最下方的“溶液计算器”
• TargetMol公众号里“科研奖励”-->"科研小工具"
  
  

4）如何制备工作液，以避免析出的情况发生？

①工作液浓度可以参考文献确定，再根据母液浓度进行稀释；

②稀释时先将培养基温浴至37℃，之后将母液加入培养基中直接稀释至工作液浓度即可

③如果有多个工作液浓度，可以先稀释至最大的那个浓度，再用培养基进行梯度稀释，按上述过程操作一般不会有析出的情况发生。

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振振公子

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xqliu

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