试剂试液配制问题-稀释比例、配制方式

若风汨罗

在试剂试液配制过程中有如下两种情形：
情形一：
药典规定精密称取对照品1、对照品2、对照品3适量，加溶剂A分别制成每1ml中含对照品1、对照品2、对照品3各10ug的溶液，分别精密量取上述对照品溶液各5ml，混匀。
实际配制精密称取对照品1、对照品2、对照品3适量，置同一容量瓶，加溶剂稀释至刻度，混匀。
情形二：
规定取对照品约12.5mg，精密称定，置250ml量瓶中，用适量溶剂A溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得（每lml含对照品50μg）。
实际配制称取10.81mg，溶解至100ml，再取25ml溶解至50ml，最终配得浓度每lml含对照品50μg。
以上两种情形可被接受吗？

13956162016

不接受。
情形一你猜为什么要分别配置，就是其他地方可能要用到单体这些啊，而且对照品混合后时间长了你确定不会发生变化吗？一个对照品溶液母液一般能用挺长时间的。
情形二，12.5mg相当小了，你还缩小称量量增加一部吸取稀释，这不是增大误差么，你要是放大称量量，不增加稀释还行。另外你有没有想过   他直接用250ml的瓶子，会不会是想降低溶剂A的影响？

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到时候GMP检查的时候会被提问

若风汨罗

13956162016 发表于 2024-9-29 13:31
不接受。
情形一你猜为什么要分别配置，就是其他地方可能要用到单体这些啊，而且对照品混合后时间长了你确 ...

针对情形一，配制后的对照品溶液进行了对照品溶液的稳定性考察。其他地方用到的单独配制。
针对对情形二，生产批次少，配多了存在对照品浪费。
能接受吗？

机智鼠

在药学和医疗器械领域，试剂试液的配制需严格遵循相关法规和指南。对于所述两种情形：

1. **情形一**：实际配制中将对照品1、2、3置于同一容量瓶并稀释至刻度的做法，与药典规定的方法存在差异。药典要求分别配制再混合，以确保每种成分的精确浓度。因此，情形一的实际操作不可接受。

2. **情形二**：虽然最终浓度符合要求，但实际操作中的逐级稀释方法可能导致误差累积。应严格按照规定操作，确保浓度准确。

综上所述，建议严格按照药典或相关指南的规定进行试剂试液的配制，以保证实验结果的准确性和可靠性。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

Mothong

如果是我来做，我肯定会按规定来，这看着也省不了什么事以及对照品，还要落的核查时候要多和老师解释的风险，三个字，没必要

门门

Mothong 发表于 2024-9-29 14:29
如果是我来做，我肯定会按规定来，这看着也省不了什么事以及对照品，还要落的核查时候要多和老师解释的风险 ...

情形二没什么可说的，原方法比他实际强得多。
情形一嘛（在没看到具体物质是啥的情况下)原方法和实际半斤八两，浓度都不是一步就能达到的。

風煙流沐·逍遙

若风汨罗 发表于 2024-9-29 13:42
针对情形一，配制后的对照品溶液进行了对照品溶液的稳定性考察。其他地方用到的单独配制。
针对对情形二 ...

第一个混合对照品之间会产生相互作用，而且如果药典上没有标注相对保留时间，首次检验以及验证时是需要定位的，你的精度和要求只能与药典相同甚至高于药典，不能低于药典。单独配置也好，用到其他地方也好，需要在sop上详细标注的，与药典不同，就得考虑是否是风险点，是否需要更详细完备的验证过程。
第二个，检验只考虑结果精度，不考虑对照品是否浪费，所有为了节省对照品用量而造成的检验精度降低，都是不接受的。

安安份份的小尘1

针对您描述的两种对照品溶液配制情形，是否可接受需基于药典规范、科学严谨性及检测准确性进行判断。以下是具体分析：

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情形一分析

药典规定步骤：

  1. 精密称取三种对照品（各自适量）。

  2. 分别加溶剂A制成单标溶液（每1ml含各对照品10μg）。

  3. 分别精密量取5ml，混匀得混合溶液。

实际配制步骤：

  1. 精密称取三种对照品，置于同一容量瓶。

  2. 加溶剂稀释至刻度，直接得到混合溶液。

是否可接受？

不可接受，原因如下：

  1. 违反精密操作原则：

       药典要求先制备单一对照品储备液，再按比例混合，可确保每个对照品在溶剂中完全溶解且浓度精确。直接混称可能导致：

           不同对照品溶解性差异（如溶解度低、反应性物质）影响定容（https://baike.baidu.com/item/%E5%AE%9A%E5%AE%B9/7926336）体积准确性。

           称量误差交叉干扰（如吸湿性对照品称量时相互污染）。

  2. 失去浓度验证基础：

       分别配制单标溶液后混合，可通过单独检测各单标溶液浓度验证准确性；直接混合无法追溯单个对照品的实际称量结果。

  3. 不符合GMP/GLP要求：

       未按法定方法操作可能被审计视为偏差，影响数据可靠性。



结论：应按药典规定分别配制单标溶液后再混合。

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情形二分析

药典规定步骤：

  1. 取对照品约12.5mg，精密称定。

  2. 置250ml量瓶中，溶剂A溶解→流动相定容（https://baike.baidu.com/item/%E5%AE%9A%E5%AE%B9/7926336）→得50μg/ml溶液。

实际配制步骤：

  1. 称取10.81mg → 溶解至100ml（浓度108.1μg/ml）。

  2. 取25ml稀释至50ml →最终浓度54.05μg/ml（理论目标50μg/ml）。

是否可接受？

不可接受，原因如下：

  1. 浓度偏差超出允许范围：

       实际终浓度（54.05μg/ml）与目标值（50μg/ml）存在+8.1%误差，远超药典对对照品溶液的精度要求（通常RSD≤1-2%）。

  2. 操作步骤引入额外误差：

       多步稀释（100ml定容→25ml移取→50ml定容）累积了容量器具的允差（如A级容量瓶±0.08ml，移液管±0.03ml），显著增加不确定度。

  3. 违反药典指令：

       药典明确要求“置250ml量瓶一步定容”，实际步骤擅自变更方法且未经验证。

  4. “约12.5mg”的理解错误：

       “约”指称量值可在一定范围（如12.5mg±10%），但必须按比例调整定容体积。例如：

           若称量11.25mg，应定容至225ml（11.25mg÷225ml=50μg/ml）。

           实际称量10.81mg却未调整体积，导致浓度错误。



结论：应严格按药典步骤操作，称量后一步定容至指定体积。

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关键原则总结

  1. 法定方法优先性：

       药典方法作为强制性标准，步骤变更需经充分验证并备案，否则视为不合规。

  2. 精密配制的核心要求：

       减少操作步骤（如避免多步稀释）以控制误差。

       确保每个对照品独立溶解完全。

  3. 浓度精度控制：

       终浓度与目标值的偏差需符合检测要求（如含量测定RSD≤2%，杂质测定≤5-10%）。

改进建议

   情形一：严格分别配制单标溶液，验证各溶液浓度后再混合。

   情形二：

       按药典称取约12.5mg（记录实际值，如12.53mg），溶解并一步定容（https://baike.baidu.com/item/%E5%AE%9A%E5%AE%B9/7926336）至250ml。

       若需更低称样量，应调整体积（如称10.00mg→定容至200ml）。



注：所有变更均需通过方法验证，证明其等效性或更优，并记录在质量控制文件中。