细菌内毒素

蒲公英667871201

无菌微针贴片，检测细菌内毒素，样品处理这，有什么可以参考的资料吗？怎么进行浸泡，用多少水合适，还在研发阶段，限量什么的都没有，用该如何进行下去？

北风12

药典，ST72，这些都可以参考哈

GYT

应该可以参照：GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物试验，里面的4.5项下有描述浸提液体积

GYT

GYT 发表于 2025-6-16 19:53
应该可以参照：GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物试验，里面的4.5项下有 ...

4.细菌内毒素

小月dq7

解决方案请参考：
一、资料与标准
法规依据：中国药典 2020 版四部通则 1143、2025 年版药典将动态浊度法、ISO 11737-1、ISO 11737-3。
技术文献：
微针材料特性：可溶性微针（如胶原蛋白、PLGA）需在湿润环境中溶解后提取内毒素，金属微针需关注重金属污染与表面吸附特性。
干扰处理：复杂样品（如含药物或防腐剂）需通过超滤、稀释或 pH 调节（6-8）消除干扰，并通过加标回收实验验证方法有效性（回收率 50-200%）。

二、样品处理与浸泡方案
（一）提取
浸泡参数优化，如体积比例、提取温度、时间、转速等提取条件的探索与控制，确保内毒素充分释放
参数验证：按优化后的参数提取并取上清液，通过鲎试剂法检测回收率，优化提取效率，确定浸泡参数。
（二）检测
可溶性微针：溶解后直接检测溶液，若溶液浑浊需过滤或稀释至透光率≥70%。
示例：胶原蛋白微针用 20 倍体积无热原水浸泡，5 分钟内完全溶解后取上清液。
金属微针：超声处理时加入 0.01% 吐温 - 20 增强表面活性，减少内毒素吸附。
重金属污染风险需同步检测（如 ICP-MS），确保不干扰鲎试剂反应。

三、研发阶段限量设定
（一）首先参考标准
保守限值：参考注射剂标准（≤0.5EU/mL）或局部用医疗器械内控标准（≤0.25EU/mL）。或已上市同类产品质量标准；示例：取 3 批样品检测，若均≤0.1EU/mL，可初步设定内控标准为≤0.2EU/mL。
评估风险：结合临床使用场景（如是否接触创面）调整：浅表使用：≤0.5EU/mL；深部组织接触：≤0.25EU/mL
参考 ISO 11737-1 的公式：内毒素限值=K×M/V（K=5EU/kg/h，M 为最大使用剂量，V 为接触体积）。
（二）验证
方法学验证：
线性范围：覆盖 0.01-10EU/mL，相关系数 R²≥0.995。
精密度：重复性 RSD≤15%，中间精密度 RSD≤20%。
干扰试验：添加 0.05EU/mL 内毒素，回收率应在 50-200% 之间。