纯化水微生物限度检验

陈利欣

纯化水微生物限度检验的检验量，药典规定不少于1ml，我可以只过滤1ml吗

世间始终你好

根据《中国药典》（2020年版四部）微生物限度检查法（1105）中的规定，对于纯化水等供试品，其微生物限度检验的最小检验量为1 mL，但这并不等于只能检验1 mL。实际操作中是否可以只过滤1 mL，需要结合目的、标准限度、以及方法学合理性分析。

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一、原文要求（药典依据）：

“供试品的检验量应根据其规定的微生物限度、预计的污染水平以及方法的灵敏度等因素而定。最小检验量不得少于1 mL。”

也就是说：

• 药典要求至少要检验1 mL，不少于；
  
• 实际上根据样品污染风险，常规不建议只做1 mL，尤其是限度标准宽松或期望检出灵敏度高时。
  
  

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二、纯化水微生物限度的常规做法对于制药用纯化水（非注射用）：

• 限度通常为 ≤100 CFU/mL（某些企业内控标准为 ≤10 CFU/mL）；
  
• 常规检测量为100 mL，用**薄膜过滤法（膜孔径0.45 μm）**进行；
  
• 如果过滤100 mL后菌落为0，则满足 ≤1 CFU/mL 的判定要求。
  
  

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三、是否可以只过滤1 mL？1. 合规风险分析：项目只过滤1 mL常规100 mL
灵敏度只能检出 ≥1000 CFU/mL（检出下限高）检出限低，可检出1 CFU/mL
检出概率较低，易漏检高，风险可控
方法学合理性不推荐，除非污染严重推荐
药典适配理论允许（≥1 mL）标准做法2. 哪些情况下才可以考虑用1 mL？

• 方法学验证明确证明1 mL足以满足检出灵敏度和风险控制；
  
• 特殊产品如原料浓缩液，污染水平高、含抑菌成分，不适合大体积过滤；
  
• 临时应急样品、无法获取大体积样时，可做为初筛用，后续仍应补做验证。
  
  

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四、监管与实践建议：

• GMP现场检查时，只做1 mL会被质疑是否有科学依据与方法验证；
  
• 推荐按100 mL执行，如有困难，可选10 mL或1 mL做为验证或辅检用量；
  
• 如果你打算只做1 mL，一定要有书面方法学验证数据支撑（灵敏度、回收率、假阴性概率等）；
  
  

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结论：

你可以过滤1 mL，但前提是必须有合理的科学依据支持该检验量满足预期检出灵敏度。否则应遵循行业常规，使用100 mL样品进行检测。

如你需要，我可以帮你设计一份微生物限度检测量的方法学验证方案（例如：不同取样量对灵敏度、检出率的影响）。需要的话告诉我你目前用的是哪种水、预期限度是多少。

wbtxp

谢谢楼主的分析和建议。

陈利欣

世间始终你好 发表于 2025-7-22 17:07
根据《中国药典》（2020年版四部）微生物限度检查法（1105）中的规定，对于纯化水等供试品，其微生物限度检 ...

感谢老师的指导，刚从药企转行到医械，医械的好多sop做的太抽象，实在不敢用。现在药典升版，正好可以修订纯化水的检验用量。一直不能说服领导修改过滤量的问题，领导就认为按照药典规定的检验量，我们的sop没有问题。这样的解答有专业又清晰，不愧是大佬。太感谢啦

亳州同仁

建议是做方法学验证，药典规定是1ml，其它因素，如设施设备，1ml检验不出来呢。

生鱼汤

要看你们厂自己的纯化水干净程度，因为纯化水标准是＜100cfu/ml，检验的时候可以1ml，也可以10ml，如果你们厂的纯化水里面菌比较少，1ml里面只有几个菌的话，这时候可以加大检验量，10ml。
如果纯化水里面菌比较多，10ml里面的菌超过100cfu，就不好计数，采用1ml。
如果1ml的话就要加点缓冲液或者0.9%氯化钠溶液铺满滤膜混匀，不然1ml直接加到滤膜里面，还没润够整张膜就没了。